Principiul de funcționare al microscopului confocal laser
Principiul de funcționare al microscopului confocal laser
Microscopul confocal laser Olympus este un detector care poate prelua semnale. Principiul său de funcționare este că o sursă de lumină punctuală va fi imaginea ca un punct mărit numit „Disc aerisit” după trecerea printr-un microscop cu fluorescență. Într-un microscop confocal interferometric standard cu lumină albă, lumina emisă în afara planului focal este blocată de un orificiu a cărui dimensiune determină cât de mult din discul Airy poate intra în detector. Cu cât orificiul este mai mic, cu atât imaginea rezultată este mai clară și imaginea este mai slabă, deoarece cea mai mare parte a luminii se pierde. Cu cât orificiul de deschidere este mai mic, cu atât rezoluția este mai bună, dar, din nou, cu atât se pierde mai mult semnal luminos. Microscopul confocal laser Olympus poate oferi o imagine CCD color și o imagine confocală cu scanare laser în același timp. Microscoapele laser confocale Olympus sunt capabile să măsoare înălțimea printr-o configurație confocală de o sursă de lumină, o probă și un detector. Când proba este situată în planul focal al lentilei obiectiv și lumina laser reflectată de suprafața probei este focalizată în deschiderea confocală, fotodetectorul va primi semnalul de la probă. Când eșantionul este în poziția de focalizare, deschiderea confocală nu primește semnalul laser, deci este colectat doar semnalul focalizat. Această caracteristică poate realiza funcția de secționare optică a microscopului confocal laser Olympus.
Avantajele microscopiei laser confocale
1. Folosind lumina laser ca sursă de lumină, după ce sunt marcate sondele fluorescente corespunzătoare, proba este scanată punct cu punct pentru a obține imagini cu secțiune transversală optică bidimensională strat cu strat. Are funcția de „CT celular” și poate fi susținut de software-ul computerizat de reconstrucție tridimensională pentru a obține imagini tridimensionale, care pot fi rotite în orice unghi pentru a observa forma tridimensională și relația spațială a celulelor și țesuturilor;
2. Poate observa celulele și țesuturile vii fără deteriorare și poate măsura în mod dinamic informațiile fiziologice ale celulelor vii, cum ar fi concentrația ionilor de Ca și valoarea pH-ului în celule;
3. Poate măsura fluiditatea membranei celulare, comunicarea intercelulară, fuziunea celulară, elasticitatea citoscheletului etc. și poate fi folosit ca „cuțit ușor” pentru a finaliza „chirurgia” intracelulară. Această tehnologie permite observarea și măsurarea dinamică și cantitativă in situ a celulelor și țesuturilor vii.
