De ce mărirea unei lentile de ulei este mai mare decât cea a unui obiectiv obișnuit?
Motive pentru care bacteriile trebuie fixate înainte de colorare în experimentele microbiologice:
1: Omorâți celulele și faceți colorantul ușor de colorat.
Doi: faceți ca bacteriile să adere la lama de sticlă și să nu fie spălate ușor de apă.
La fixare, uscați încet. Dacă doriți cu adevărat să accelerați procesul, îl puteți usca de câteva ori la o distanță deasupra flăcării unei lămpi cu alcool. Nu uscați sticla astfel încât să se încălzească, altfel poate distruge forma de viață bacteriană.
Colorația Gram și observarea microscopică a bacteriilor
Principiul experimental
Principiul colorației Gram: Reacțiile diferite ale bacteriilor la colorația Gram se datorează compoziției și structurii diferite a pereților lor celulari. Peretele celular al bacteriilor Gram-pozitive este în principal o rețea de peptidoglicani. Când este tratată cu etanol, dimensiunea porilor structurii rețelei devine mai mică din cauza deshidratării, iar permeabilitatea scade, provocând astfel formarea complexului de cristal violet-iod. Substanța nu este ușor eluată și rămâne în celule. După decolorare și contracolorare, culoarea albastru-violet a colorantului primar este încă păstrată. Stratul de peptidoglican al peretelui celular al bacteriilor Gram-negative este subțire și are un conținut ridicat de lipide. Prin urmare, în timpul decolorării, lipidele sunt dizolvate de etanol (sau acetonă), iar permeabilitatea peretelui celular crește, făcând complexul cristal violet-iod. Este relativ ușor de eluat. După contracolorarea cu contracolorant, celulele sunt colorate cu culoarea roșie a contracolorului. Principiul imaginii la microscop: Microscoapele optice obișnuite moderne folosesc două sisteme de lentile, oculare și lentile obiective, pentru a mări imaginile, așa că sunt adesea numite microscoape compuse. În sistemul optic al unui microscop, performanța lentilei obiectiv este cea mai critică. Lentila de ulei are cea mai mare mărire și este cea mai importantă pentru cercetarea microbiologică. Scopul principal al adăugarii de picături de ulei pentru lentile între diapozitiv și lentilă este de a crește luminozitatea iluminării și de a crește rezoluția microscopului. Utilizarea uleiului în loc de aer ca mediu de propagare a luminii reduce refracția sau reflexia totală a luminii, făcând imaginea observată mai clară.
Căutați coloniile bacteriene care urmează să fie observate la microscop cu mărire redusă (continuați să mișcați lama, dacă simțiți o umbră roșie, opriți imediat, reglați mărirea, dacă nu este o colonie, continuați să priviți), ridicați cilindrul , apoi treceți la lentila de ulei. Adăugați o picătură de ulei de cedru în zona de probă și utilizați reglajul grosier pentru a coborî cu atenție cilindrul lentilei, astfel încât lentila de ulei să fie scufundată în uleiul lentilei și aproape în contact cu specimenul. Ridicați condensatorul în poziția cea mai înaltă și deschideți deschiderea. Utilizați reglatorul grosier pentru a ridica încet cilindrul obiectivului până când imaginea obiectului apare în câmpul vizual și utilizați reglatorul fin pentru a o clarifica și focalizată.
