De ce trebuie să folosiți un microscop confocal?
1. Microscoapele optice au atins o stare de perfecțiune prin eforturile și îmbunătățirile marilor noștri predecesori. De fapt, microscoapele obișnuite ne pot oferi imagini microscopice frumoase simplu și rapid. Cu toate acestea, a avut loc un eveniment care a adus inovații revoluționare în această lume aproape perfectă a microscopiei. Aceasta a fost inventarea „microscopului confocal cu scanare laser”. Caracteristica acestui nou tip de microscop este că folosește un sistem optic care extrage informații despre imagine doar de pe suprafața unde este focalizat focalizarea și restabilește informațiile obținute în memoria imaginii în timp ce schimbă focalizarea, obținând astfel informații 3D complete. O imagine vie a inteligenței. Prin această metodă se pot obține cu ușurință informații despre forma suprafeței care nu pot fi confirmate cu un microscop normal. În plus, pentru microscoapele optice obișnuite, „creșterea rezoluției” și „aprofundarea adâncimii de focalizare” sunt condiții conflictuale, în special la măriri mari. Cu toate acestea, în microscopia confocală, această problemă este ușor de rezolvat.
2. Avantajele sistemului optic confocal
Sistemul optic confocal realizează iluminarea punctuală a probei, iar lumina reflectată folosește, de asemenea, un receptor punctual pentru a primi lumina. Când proba este plasată în poziția de focalizare, aproape toată lumina reflectată poate ajunge la fotoreceptor. Când proba nu este focalizată, lumina reflectată nu poate ajunge la fotoreceptor. Cu alte cuvinte, în sistemul optic confocal, va fi scoasă numai imaginea care coincide cu focalizarea, iar punctele de lumină și lumina împrăștiată inutilă vor fi ecranate.
3. De ce să folosiți laserul?
În sistemul optic confocal, proba este iluminată într-un punct, iar lumina reflectată este, de asemenea, primită folosind un fotoreceptor punctual. Prin urmare, sursele de lumină punctiforme devin necesare. Laserele sunt surse de lumină foarte punctuale. În majoritatea cazurilor, sursa de lumină a microscoapelor confocale utilizează surse de lumină laser. În plus, caracteristicile laserului, cum ar fi monocromaticitatea, directivitatea și forma excelentă a fasciculului sunt, de asemenea, motive importante pentru adoptarea sa pe scară largă.
4. Observarea în timp real bazată pe scanarea de mare viteză devine posibilă
Pentru scanarea laser, se folosește un deflector optic acustic (element AO) în direcția orizontală și o oglindă de scanare cu fascicul servo controlat electric (Servo Galvano-oglindă) este utilizată în direcția verticală. Deoarece unitatea de deviere acustic-optică nu are o parte mecanică de vibrație, poate scana la viteză mare, făcând posibilă observarea în timp real pe ecranul de monitorizare. Viteza mare a acestui tip de imagini este un element foarte important care afectează direct viteza de focalizare și de regăsire a poziției.
5. Relația dintre poziția focalizării și luminozitate
În sistemul optic confocal, luminozitatea este maximă atunci când proba este plasată corect în poziția de focalizare, iar luminozitatea acesteia va scădea brusc în față și în spatele acesteia (linia continuă din Figura 4). Această selectivitate sensibilă a planului focal este, de asemenea, principiul din spatele determinării direcției înălțimii și extinderii adâncimii focalizării microscopului confocal. În schimb, un microscop optic normal nu are modificări evidente de luminozitate înainte și după poziția de focalizare (linia punctată în Figura 4).
6. Contrast ridicat și rezoluție mare
În microscoapele optice obișnuite, lumina reflectată din partea nefocalizată va interfera și se va suprapune cu partea de focalizare a imaginii, rezultând o reducere a contrastului imaginii. În schimb, în sistemul optic confocal, lumina parazită în afara focalizării și lumina parazită din interiorul lentilei obiectiv sunt aproape complet eliminate, astfel încât se poate obține o imagine cu contrast foarte mare. În plus, deoarece lumina trece prin lentila obiectivului de două ori, imaginea punctuală este ascuțită, ceea ce îmbunătățește și puterea de rezoluție a microscopului.
