Ce specificații de probă sunt necesare pentru microscopia cu lumină?
În procesul de pregătire a probei al microscopului optic, grosimea feliei probei este între 2-25um; grosimea feliei microscopului electronic este în 50-100nm (cu excepția microscopului electronic de înaltă tensiune, a cărui grosime a probei poate ajunge la 1um), așa că metoda de felie utilizată nu este deloc aceeași.
În ceea ce privește purtătorul, purtătorul secțiunii microscopului optic este o lamă de sticlă, în timp ce purtătorul secțiunii microscopului electronic este grilă.
În ceea ce privește fixarea, feliile microscopului optic sunt fixate cu un fixativ compus, în timp ce feliile microscopului electronic sunt fixate în mod repetat cu un singur fixativ.
În ceea ce privește colorarea, colorarea probelor optice este relativ simplă. Conform diferitelor mostre de observare și tipuri de microscoape optice, este de obicei suficient să se coloreze cu niște agenți de colorare fixați. Există multe și complicate metode pentru recolorarea probelor de microscop electronic, cum ar fi colorarea negativă, colorarea cu argint și așa mai departe.
În ceea ce privește înglobarea, parafina, colodionul, gelatina etc. sunt utilizate ca agenți de înglobare pentru secțiunile de microscop optic; Rășina epoxidică, rășina polistiren, rășina izobutilenă și rășina solubilă în apă sunt utilizate ca agenți de înglobare pentru secțiunile microscopului electronic.
Pentru a se asigura că câmpul vizual al microscopului poate fi iluminat uniform și complet, sistemul optic de iluminare trebuie ajustat atunci când microscopul este instalat și depanat pentru prima dată. Acesta este un mijloc important și cel mai elementar mod de a utiliza corect microscopul și de a obține rezultate corecte și de încredere. cerințe. În plus, stăpânirea corectă a ajustării sistemului de cale optică de iluminare este un pas necesar după înlocuirea becului sursei de lumină în timpul utilizării microscopului și este, de asemenea, un mijloc necesar pentru a verifica performanța microscopului din când în când în timpul zilnic. utilizare. Reglarea sistemului de cale optică de iluminare a microscopului include în principal următoarele patru elemente: 1. Reglarea preliminară a camerei lămpii sursei de lumină în afara microscopului ① Deschideți mai întâi carcasa camerei lămpii, apăsați clema cu arc pentru a pune becul cu halogen în soclu și evitați contactul direct cu becul cu degetele în timpul instalării (poate fi separat cu o cârpă moale sau hârtie) pentru a evita Amprentele digitale și alte murdărie pe bec, care vor afecta durata de viață a becului. ②Puneți caseta lămpii pe masă, după ce porniți alimentarea, utilizați o șurubelniță specială pentru a regla orificiul butonului de focalizare al lămpii (marcat cu „←→”), astfel încât filamentul să fie proiectat pe perete 1-2 m distanță, iar imaginea filamentului este ajustată. Apoi reglați înălțimea lămpii și reglați orificiul filetului (marcat cu „──”) pentru a face poziția filamentului adecvată; apoi reglați poziția stângă și dreaptă a lămpii pentru a regla orificiul șurubului (marcat cu „──”) pentru a face poziția din stânga și dreapta a filamentului adecvată.
2. Scopul verificării și corectării poziției sursei de iluminare (filament) în microscop este de a regla capătul imaginii al iluminatorului direct în câmpul vizual al lentilei obiectivului și de a se asigura că câmpul de vedere al microscopul este iluminat complet și uniform din perspectiva sursei de lumină. Iluminarea, care este o condiție prealabilă pentru reglarea sistemului de iluminat Kuhler. Instrumente de bază necesare: Telescopul de centrare este echipat la achiziționarea microscopului. ① Deconectați manșonul din sticlă mată din carcasa lămpii și puneți carcasa lămpii înapoi pe microscop. ② Alegeți o lentilă obiectiv de 10×, porniți programul sursă de lumină pentru a găsi eșantionul și focalizați-l clar, apoi utilizați o lentilă obiectiv de 40× pentru a focaliza în mod clar proba (lentila obiectiv de 40× Puteți vedea întreaga imagine a filamentului ); ③ Deschideți la maximum diafragma de deschidere și diafragma de câmp a condensatorului; ④ Deconectați unul dintre oculare, înlocuiți-l cu un telescop de centrare, apucați partea albă, întindeți ocularul negru cu cealaltă mână, puteți vedea imaginea filamentului în câmpul vizual; ⑤ Dacă poziția filamentului nu este adecvată, reglați gaura „──” pentru a regla imaginea filamentului în direcția orizontală și reglați gaura „──” pentru a regla imaginea filamentului în direcția verticală până când Reglați imaginea filamentului la imaginea circulară ușoară care doar umple deschiderea lentilei obiectivului; ⑥ După reglare, introduceți manșonul din sticlă mată înapoi în poziția inițială, deconectați telescopul de centrare și înlocuiți ocularul pentru următoarea reglare. Ajustarea menționată mai sus a camerei lămpii sursei de lumină de iluminare în afara microscopului și verificarea poziției corpului luminos al sursei de lumină în interiorul microscopului trebuie efectuate numai atunci când microscopul este instalat și depanat pentru prima dată și când becul este înlocuit. , iar microscopul nu poate fi reglat aleatoriu atunci când se utilizează microscopul. În caz de confuzie, acesta poate fi ajustat înapoi la starea inițială conform pașilor de mai sus.
3. Reglarea corectă a sistemului de iluminare Kohler Una dintre sarcinile principale ale ajustării corecte a microscopului este reglarea sistemului de cale optică de iluminare, iar cheia este reglarea sistemului de iluminare Kohler. Pentru fiecare persoană care folosește un microscop, în special cei care fac microfotografii, ar trebui să aibă o anumită înțelegere și stăpânire a principiului sistemului de iluminare Kuhler și a etapelor de reglare a acestuia pentru a juca pe deplin funcțiile microscopului și a face fotografii. Fotografiile care ies pot fi mai consistente și perfecte în efect. Principiul sistemului de iluminare Kohler este simplu: lumina emisă de orice punct al sursei de iluminare poate ilumina câmpul vizual al microscopului, iar lumina emisă de fiecare punct al sursei de lumină este colectată, iar în câmp de vedere a microscopului Se realizează o iluminare foarte completă și uniformă. Scopul ajustării sistemului de iluminare Kuhler este de a obține o iluminare uniformă și suficientă pentru câmpul vizual observat și de a preveni ca lumina parazită să afecteze sau să interfereze cu sistemul de imagine, astfel încât să se evite aburirea filmului în timpul fotografierii. Componente necesare pentru un sistem de iluminare Kohler cu ajustare ridicată: diafragmă de câmp, sistem de lentile de condensator care poate fi reglat pe axă. ① Selectați 10× obiectiv obiectiv și 10× ocular ② Puneți lentila frontală a condensatorului pe calea optică, reglați diafragma de deschidere într-o poziție moderată (nu prea mare sau mică), apoi ridicați condensatorul la poziția de sus și reglați placa turnantă a condensatorului în poziția Bright field „J” ③ Reglați diafragma de câmp la minim (0,1)
④ Puneți proba biologică sigilată pe scenă, porniți sursa de lumină și focalizați clar
⑤ Va exista o zonă parțial iluminată sau un punct luminos în câmpul vizual, care este imaginea neclară a diafragmei de câmp, în care detaliile probei pot fi văzute clar; în afara ei este un câmp vizual mai întunecat, care poate să nu vadă neapărat detaliile eșantionului
⑥Ajustați ușor condensatorul în jos, astfel încât punctul luminos din câmpul vizual să se micșoreze treptat și să devină treptat o imagine poligonală clară, care este imaginea clară a diafragmei de câmp;
⑦În general, imaginea poligonală nu este în centrul câmpului vizual și este necesar să reglați o pereche de șuruburi de centrare ale condensatorului pentru a regla imaginea poligonală a diafragmei de câmp în poziția centrală;
⑧Deschideți treptat diafragma câmpului vizual pentru a face din imaginea poligonului un poligon înscris în câmpul vizual și verificați în continuare starea de aliniere. Dacă alinierea nu este ideală, continuați să reglați fin șurubul de aliniere;
⑨Deschideți ușor diafragma câmpului vizual, astfel încât imaginea poligonală să dispară pe marginea câmpului vizual. Până acum, reglarea sistemului de iluminare Kohler este finalizată. După ce sistemul de iluminare Kohler este ajustat, întregul câmp vizual este iluminat uniform, iar micrografiile realizate sunt luminoase și clare, cu contrast normal.
