Care este diferența dintre microscopul cu fluorescență și microscopul inversat?
Microscopul este un instrument important în cultura celulară și experimentele derivate aferente. În prezent, pe piață există diferite tipuri de microscoape. Este o provocare să alegi un microscop care să corespundă nevoilor tale și să fie potrivit. În cele ce urmează sunt prezentate principiile microscoapelor inversate și ale microscoapelor cu fluorescență, astfel încât să puteți alege cu ușurință.
Compoziția unui microscop inversat este aceeași cu cea a unui microscop obișnuit și include în principal trei părți: o parte mecanică, o parte de iluminare și o parte optică.
Compoziția unui microscop inversat este aceeași cu cea a unui microscop vertical obișnuit, cu excepția faptului că obiectivul și sistemul de iluminare sunt inversate, primul se află sub scenă și al doilea este deasupra scenă.
Această structură permite extinderea semnificativă a distanței efective dintre sistemul de concentrare a iluminarii și scenă, ceea ce este convenabil pentru plasarea obiectelor mai groase care trebuie observate, cum ar fi vase Petri și baloane de cultură celulară (desigur, lamele de sticlă sunt, de asemenea, acceptabile). Distanța de lucru dintre ele nu trebuie să fie foarte mare.
Microscopul inversat este utilizat pentru observarea microorganismelor, celulelor, bacteriilor, culturilor de țesuturi, suspensiilor, sedimentelor etc. în unitățile medicale și sanitare, colegii și universități și institute de cercetare. Poate observa continuu procesul de reproducere și diviziune a celulelor și bacteriilor în mediul de cultură și poate fotografia orice formă a acestui proces.
Este utilizat pe scară largă în citologie, parazitologie, oncologie, imunologie, inginerie genetică, microbiologie industrială, botanică și alte domenii.
Microscopia cu fluorescență este utilizată pentru a studia absorbția, transportul, distribuția și localizarea substanțelor chimice în celule.
Pentru obiectul de inspectat, există două moduri de generare a fluorescenței: autofluorescența, care emite fluorescență direct după iradierea ultravioletă; fluorescență secundară, care poate emite fluorescență după ce obiectul de observat este tratat cu coloranți fluorescenți și apoi iradiat cu lumină ultravioletă.
Unele substanțe din celule, cum ar fi clorofila, produc autofluorescență după ce sunt iradiate de razele ultraviolete; unele substanțe nu pot fluoresce de la sine, dar dacă sunt colorate cu coloranți fluorescenți sau cu anticorpi fluorescenți, pot emite și fluorescență secundară după ce au fost iradiate de raze ultraviolete.
Microscopul cu fluorescență utilizează o sursă de lumină punctiformă cu eficiență luminoasă ridicată și emite lumină cu o anumită lungime de undă (lumină ultravioletă 365 nm sau lumină albastră violetă 420 nm) prin sistemul de filtru de culoare ca lumină de excitație, după ce excita substanțele fluorescente din specimen pentru a le emite diverse culori de fluorescență și apoi Observați prin mărirea obiectivului și a ocularelor.
Sub fundalul de contrast puternic, chiar dacă fluorescența este foarte slabă, este ușor de identificat și are o sensibilitate ridicată. Este folosit în principal pentru studiul structurii și funcției celulelor și al compoziției chimice.
