Microscop de biofluorescență verticală
Principiul microscopiei fluorescente este de a utiliza o sursă de lumină cu punct extrem de eficient (cum ar fi o lampă de mercur cu presiune ultra-ridicată) pentru a emite o anumită lungime de undă de lumină (cum ar fi lumina ultravioletă 3650 λ sau lumina albastră violet 4200 λ) printr-un sistem de filtru de culoare ca excitație, care excită substanțele fluorescente din specimenul în emitând diferite culori de fluorescență. Apoi, este filtrat printr -un filtru de blocare (sau suprimare) din spatele obiectivului obiectiv și observat prin efectul de mărire a ocularului.
Filtrul de blocare are două funcții: în primul rând, absoarbe și blochează lumina de excitație de la intrarea în ocular pentru a evita interferarea cu fluorescența și dăunerea ochilor; Al doilea este să selectați și să permiteți trecerea fluorescenței specifice, prezentând o culoare fluorescentă specifică.
Microscopele fluorescente pot fi împărțite în două tipuri pe baza principiului căii luminii:
1.. Microscop cu fluorescență de transmisie
Microscopele cu fluorescență mai vechi folosesc un reflector pentru a excita fluorescența trecând sursa de lumină de excitație prin materialul eșantionului. Avantajul său este fluorescența puternică la mărire scăzută, dar dezavantajul său este că fluorescența sa scade odată cu creșterea măririi. Deci, este potrivit doar pentru observarea materialelor cu eșantioane mai mari.
2. Microscop cu fluorescență ușoară care se încadrează
Lumina de excitație cade de la obiectivul obiectiv pe suprafața specimenului, folosind aceeași lentilă obiectivă ca condensatorul de iluminare și obiectivul obiectiv pentru colectarea fluorescenței.
Pe calea optică trebuie să se adauge un splitter cu fascicul dublu de culoare (oglindă dicroică), care formează un unghi de 45 de grade cu axa optică. Lumina de excitație este reflectată în obiectivul obiectiv și concentrat pe eșantion. Fluorescența generată de eșantion, precum și lumina de excitație reflectată de pe suprafața lentilei obiective și a sticlei de acoperire, introduceți obiectivul obiectiv în același timp și reveniți la divizorul de fascicul de culoare dublă pentru a separa lumina de excitație și fluorescența. Lumina de excitație reziduală este apoi blocată de absorbția filtrului. Dacă se folosesc diferite combinații de filtre de excitație, separatoare de fascicul de culoare dublă și filtre de blocare, pot răspunde nevoilor diferitelor produse de reacție fluorescentă.
Avantajele acestui microscop de fluorescență sunt iluminarea uniformă a câmpului, imagistica limpede și fluorescența mai puternică, cu o mărire mai mare.
