Trei tipuri de observare la microscop
I. Câmp luminos BF (Câmp luminos BF)
Bright field BF este un mod familiar de microscopie, care este utilizat pe scară largă în patologie și testare pentru observarea secțiunilor colorate, iar toate microscoapele sunt capabile să îndeplinească această funcție.
Câmp luminos
II. Câmp întunecat DF (Câmp întunecat DF)
Câmp întunecat DF este de fapt iluminare în câmp întunecat. Este diferit de câmpul luminos prin faptul că nu observă în mod direct lumina iluminată, ci lumina reflectată sau difractată de obiectul examinat. Ca urmare, câmpul vizual devine un fundal întunecat, în timp ce obiectul examinat apare ca o imagine strălucitoare.
Principiul câmpului de vedere întunecat se bazează pe fenomenul Tyndall în optică, praful în cazul luminii puternice prin lumina directă, ochiul uman nu poate fi observat, aceasta din cauza luminii puternice din jurul cauzei. Dacă lumina este îndreptată oblic spre ea, particulele par să crească în dimensiune datorită reflectării luminii și devin vizibile pentru ochiul uman.
Un accesoriu special necesar pentru observarea în câmp întunecat este o lunetă de observare în câmp întunecat. Se caracterizează prin faptul că nu permite fasciculului de lumină să treacă prin obiectul examinat de jos în sus, ci prin modificarea traseului luminii astfel încât aceasta să fie îndreptată oblic către obiectul examinat, astfel încât lumina iluminatoare să nu intre direct în obiectiv și se formează o imagine strălucitoare prin utilizarea luminii reflectate sau difractate de pe suprafața obiectului examinat. Rezoluția observării în câmp întunecat este mult mai mare decât a observației în câmp luminos, * până la 0.02-0,004
Câmp întunecat
III. contrast de fază PH
În dezvoltarea microscopiei optice, invenția cu succes a contrastului de fază PH este o realizare importantă în tehnologia modernă de microscopie. După cum știm, ochiul uman poate distinge doar lungimea de undă (culoarea) și amplitudinea (luminozitatea) undelor luminoase, pentru specimenele biologice incolore și strălucitoare, atunci când lumina trece, lungimea de undă și amplitudinea nu se schimbă mult și este dificil. pentru a observa specimenul în observația în câmp luminos.
Microscopul cu contrast de fază folosește diferența dintre intervalul de lumină al obiectului examinat pentru examinarea microscopică, adică folosește eficient fenomenul de interferență al luminii pentru a schimba diferența de fază indistinguită a ochiului uman în diferența de amplitudine distinsă și chiar incoloră și transparentă. substanțele pot deveni clar vizibile. Acest lucru facilitează foarte mult observarea celulelor vii, astfel încât microscopia cu contrast de fază este utilizată pe scară largă în microscoapele inversate.
Principiul de bază al microscopiei cu contrast de fază este că diferența de gamă optică a luminii vizibile transmisă printr-un specimen este transformată într-o diferență de amplitudine, crescând astfel contrastul dintre diferitele structuri și făcându-le vizibile. Lumina este refractată prin specimen și se abate de la calea inițială a luminii, în timp ce este întârziată cu 1/4λ (lungime de undă). Dacă 1/4λ este crescut sau scade din nou, diferența de interval optic devine 1/2λ, iar interferența dintre cele două fascicule de fotosinteză este întărită după ce axele celor două fascicule sunt interferate, iar amplitudinea crește sau scade, astfel îmbunătățirea contrastului. În structură, microscopul cu contrast de fază are două caracteristici speciale care sunt diferite de microscopul optic obișnuit:
1. diafragma inelară (diafragma anulară) este situată între sursa de lumină și condensator, rolul este de a face lumina prin condensator pentru a forma un con gol de lumină, concentrându-se pe specimen.
2. placa de fază (placă de fază anulară) în obiectivul acoperit cu placa de fază de fluorură de magneziu, lumina directă sau difractată poate fi întârziată cu faza 1/4λ. Există două feluri:
1.O placă de fază: lumina directă întârziată 1/4 λ, două grupuri de unde luminoase coaxiale adăugării undelor de lumină, creșterea amplitudinii, structura specimenului decât mediul înconjurător este mai strălucitoare, formarea contrastului luminos (sau contrast negativ) .
2.B placa de fază: lumina difractată este întârziată cu 1/4 λ, cele două grupuri de unde luminoase după fuziunea axei undei luminoase sunt reduse, amplitudinea devine mai mică, formarea contrastului întunecat (sau contrast pozitiv). ), structura este mai întunecată decât mediul înconjurător.
