Există două tipuri de microscoape cu fluorescență în ceea ce privește calea lor optică:
1. Microscop cu fluorescență cu transmisie: sursa de lumină de excitație trece prin oglinda condensatorului prin materialul specimenului pentru a stimula fluorescența. Folosit în mod obișnuit colector de câmp întunecat, poate fi folosit și colector obișnuit, reglați reflectorul astfel încât lumina de excitație să transmită și să fie ocolită la eșantion. Acesta este tipul mai vechi de microscop cu fluorescență. Avantajul este că fluorescența este puternică la mărire scăzută, iar dezavantajul este că fluorescența este slăbită odată cu creșterea măririi. Prin urmare, este mai bine să observați materialul specimen mai mare.
2. Microscop cu fluorescență de tip cădere acesta este un nou tip de microscop cu fluorescență dezvoltat în ultima vreme, iar diferența este că excitarea luminii de la lentila obiectiv până la suprafața specimenului, adică aceeași lentilă obiectiv ca și iluminarea concentratorului și colectarea lentilelor obiectiv fluorescență. Calea optică trebuie adăugată la un separator de fascicul cu două culori, care are un unghi de 45. cu lumina uraniului, lumina de excitație este reflectată în lentila obiectivului și adunată în probă, fluorescența produsă de eșantion și obiectiv. Suprafața lentilei lentilei, reflectarea suprafeței de sticlă de acoperire a luminii de excitație în lentila obiectivului în același timp și înapoi la separatorul de fascicul în două culori, astfel încât lumina de excitare și fluorescența să fie separate de lumina de excitație reziduală și apoi să fie absorbite de filtrele de blocare. Dacă schimbați filtrul de excitație diferit / separatorul de fascicul dublu / blocul combinat de filtru de blocare, poate satisface nevoile diferitelor produse de reacție de fluorescență. Avantajele acestui microscop cu fluorescență este câmpul vizual de iluminare uniformă, imagini clare, cu cât mărirea fluorescenței este mai mare, cu atât mai puternică.
(B) metoda microscopului cu fluorescență.
1. Deschideți sursa de lumină, lampa cu mercur de ultra-înaltă presiune pentru a se preîncălzi timp de câteva minute pentru a ajunge la punctul cel mai luminos.
2. Microscopul cu fluorescență cu transmisie trebuie instalat între sursa de lumină și concentratorul necesar pentru a stimula filtrul, în spatele lentilei obiectivului cu filtrul de blocare corespunzător. Microscopul cu fluorescență în cădere trebuie introdus în fanta căii optice a filtrului de excitație necesar / separatorul de fascicul bicolor / inserțiile filtrului de blocare.
3. Observați cu o lentilă de mărire redusă și reglați centrul sursei de lumină astfel încât să fie situat în centrul întregului punct de iluminare în funcție de dispozitivul de reglare al diferitelor modele de microscoape cu fluorescență.
4. Așezați felia de specimen, se poate observa focalizarea. Utilizarea ar trebui să acorde o atenție la: sfârșitul instalării filtrelor nu utilizați ochiul pentru a observa direct, pentru a nu provoca leziuni oculare; cu o oglindă de ulei pentru a observa specimenul, trebuie să utilizați o oglindă de ulei specială nefluorescentă; Lampa cu mercur de înaltă presiune nu poate fi redeschisă imediat după închiderea lămpii, trebuie să aveți 5 minute înainte de a putea porni din nou, altfel va fi instabilă, afectând durata de viață a lămpii cu mercur.
(C) observare La microscopul cu fluorescență în stadiul de predare cu un filtru de lumină albastru-violet, celulele colorate cu o,01% colorant fluorescent amidin portocaliu pot fi văzute, iar nucleul și citoplasma celulelor sunt excitate pentru a produce două diferite culori de fluorescență (verde închis și portocaliu-roșu).
