Structura și componentele principale ale unui microscop cu fluorescență
(1) Sursă de lumină
În zilele noastre, o lampă cu mercur de ultra-înaltă presiune de 200 W este folosită în mod obișnuit ca sursă de lumină. Este realizat din sticla de cuart, cu forma sferica in mijloc si o anumita cantitate de mercur umpluta in interior. În timpul funcționării, descărcarea dintre cei doi electrozi face ca mercurul să se evapore, iar presiunea din interiorul sferei crește rapid. Când mercurul se evaporă complet, poate atinge 50-70 presiuni atmosferice standard, care durează în general aproximativ 5-15 minute. Luminescența lămpilor cu mercur de ultra-înaltă presiune este rezultatul descărcării dintre electrozi, care disociază și reduce continuu moleculele de mercur și emite fotoni. Emite lumină ultravioletă puternică și albastră violetă, care este suficientă pentru a excita diferite substanțe fluorescente, prin urmare, este utilizat pe scară largă în microscoapele cu fluorescență.
Lămpile cu mercur de ultraînaltă presiune emit, de asemenea, o cantitate mare de energie termică. Prin urmare, camera lămpii trebuie să aibă condiții bune de disipare a căldurii, iar temperatura mediului de lucru nu trebuie să fie prea ridicată.
Noua lampă cu mercur de ultra-înaltă presiune nu necesită tensiune înaltă pentru a se aprinde în stadiul incipient de utilizare. După un timp de utilizare, trebuie pornit cu tensiune înaltă (aproximativ 15000V). După pornire, tensiunea de lucru este în general menținută la 50-60V, iar curentul de lucru este de aproximativ 4A. Durata medie de viață a unei lămpi cu mercur de ultra-înaltă presiune de 200 W este de aproximativ 200 de ore când este utilizată timp de 2 ore de fiecare dată. Cu cât timpul de funcționare este mai scurt, cu atât durata de viață este mai scurtă. Dacă este utilizat doar 20 de minute o dată, durata de viață este redusă cu 50%. Prin urmare, încercați să minimizați numărul de porniri atunci când utilizați. Eficiența luminii unui bec scade treptat în timpul utilizării. După ce lumina se stinge, trebuie să aștepte răcirea înainte de a reporni. După aprinderea becului, acesta nu trebuie oprit imediat pentru a evita evaporarea incompletă a mercurului și deteriorarea electrodului. În general, trebuie să aștepte 15 minute. Datorită presiunii înalte și radiațiilor ultraviolete puternice ale lămpii cu mercur de ultra-înaltă presiune, becul trebuie plasat în camera lămpii înainte de a fi aprins pentru a evita rănirea ochilor și explozia în timpul funcționării.
Circuitul unei surse de lumină cu mercur de ultra-înaltă presiune (100W sau 200W) și componentele acesteia, inclusiv transformarea tensiunii, suprimarea curentului și pornirea. Există un sistem de reglare a centrului de lumină al becului în camera lămpii, cu un reflector concav placat cu aluminiu instalat în spatele becului și o lentilă de colectare a luminii instalată în față.
Lampa cu mercur de ultra-înaltă presiune produsă intern GCQ-200 are performanțe bune și poate înlocui becurile importate precum HBO-200, cu o durată de viață medie de peste 200 de ore și un preț relativ scăzut.
Un dispozitiv simplu și portabil cu sursă de lumină fluorescentă cu brom, tungsten, cu temperatură ridicată de culoare, dezvoltat în China, cu volum mic, greutate redusă, putere redusă, utilizare dublă a AC și DC (cu sursă de alimentare DC încorporată), ușor de transportat, convenabil de utilizat , a fost promovat și aplicat.
(2) Sistem de filtrare a culorilor
Sistemul de filtru color este o parte importantă a unui microscop cu fluorescență, constând dintr-o placă de filtru de excitație și o placă de filtru de compresie. Modelul plăcii de filtrare este adesea inconsecvent în rândul producătorilor. Plăcile filtrante sunt denumite în general după tonul de culoare de bază, prima literă reprezentând tonul de culoare, a doua literă reprezentând sticla, iar numărul reprezentând caracteristicile modelului. Microscopul Olympus
(3) Lentila obiectiv
Pot fi aplicate diverse lentile obiective, dar utilizarea lentilelor obiectiv acromatice este potrivită pentru fluorescență datorită performanței lor extrem de scăzute de autofluorescență și transmisie (gamă de lungimi de undă). Datorită faptului că luminozitatea de fluorescență a imaginii în câmpul vizual al microscopului este direct proporțională cu pătratul raportului de deschidere a obiectivului și invers proporțională cu mărirea acesteia, pentru a îmbunătăți luminozitatea imaginii cu fluorescență, o lentilă obiectiv cu un raport de deschidere mai mare trebuie utilizat. În special la mărire mare, impactul său este foarte semnificativ. Prin urmare, pentru specimenele cu fluorescență insuficientă, trebuie utilizată o lentilă obiectiv cu o rată de deschidere mare, combinată cu un ocular cât mai scăzut posibil (4 x, 5 x, 6,3 x etc.).
(4) Oglinda reflectorizanta
Stratul reflectorizant al unui reflector este în general placat cu aluminiu deoarece aluminiul absoarbe mai puțină lumină ultravioletă și vizibilă în regiunea albastru violet, cu o reflexie de peste 90%, în timp ce argintul reflectă doar 70%; În general, se folosesc reflectoare plate.
(5) Oglindă cu reflectoare
Concentratorul conceput și realizat special pentru microscopia cu fluorescență este realizat din sticlă de cuarț sau altă sticlă care transmite lumina ultravioletă. Există două tipuri de observatori de câmp întunecat cu câmp vizual distinct. Există, de asemenea, un concentrator de fluorescență diferențială.
(6) Dispozitiv de lumină în cădere
Noul tip de dispozitiv de lumină în cădere reflectă părțile cu lungime de undă mai scurtă (ultraviolete și albastru violet) de la sursa de lumină la filtrul spectrofotometrului de interferență datorită proprietăților învelișului de pe filtru. Când filtrul este orientat spre sursa de lumină la un unghi de 45 de grade. Când este înclinat, este îndreptat vertical către lentila obiectiv și îndreptat către specimen prin lentila obiectiv, provocând excitarea specimenului. În acest moment, obiectivul acționează direct ca un condensator. În același timp, părțile lungi ale filtrului (verde, galben, roșu etc.) sunt transparente pentru filtru, astfel încât nu se reflectă în direcția obiectivului. Filtrul acționează ca o placă de filtru de excitație și, deoarece fluorescența specimenului este în regiunea cu lungime de undă lungă a luminii vizibile, poate fi observată prin filtru și poate ajunge la obiectiv. Luminozitatea imaginii cu fluorescență crește odată cu mărirea și este mai puternică decât sursa de lumină transmisă la mărire mare. Pe lângă funcția sa de sursă de lumină transmisivă, este mai potrivit pentru observarea directă a specimenelor opace și semi-transparente, cum ar fi plăci groase, membrane filtrante, colonii, specimene de cultură de țesut etc. În ultimii ani, microscoapele cu fluorescență nou dezvoltate adesea utilizați dispozitive cu lumină în cădere, cunoscute sub numele de microscoape cu fluorescență cu lumină în cădere.
