Metoda de preparare a lamelor de microscop
1. Metoda frotiului
Metoda de pescuit este o metodă de preparare a lamelor prin acoperirea uniformă a materialelor pe acestea.
Materialele de frotiu includ organisme unicelulare-, alge mici, sânge, medii de cultură bacteriene, țesuturi libere de animale și plante, testicule, antere etc.
Atunci când mânjiți, trebuie acordată atenție:
(1) Lama de sticlă trebuie curățată.
(2) Lama de sticlă trebuie să fie plată.
(3) Acoperirea trebuie să fie uniformă. Aplicați picătura în partea dreaptă din mijloc a lamei de sticlă și întindeți-o uniform cu o lamă de disecție sau o scobitoare.
(4) Acoperirea trebuie să fie subțire. Folosind o altă lamă de sticlă ca lamă, împingeți ușor de la dreapta la stânga de-a lungul suprafeței lamei de sticlă cu lichidul aplicat (unghiul dintre cele două lame ar trebui să fie de 30 până la 45 de grade) și aplicați un strat subțire uniform.
(5) Fix. Dacă este necesară fixarea, pentru fixare se pot folosi fixative chimice sau metode de uscare (bacterii).
(6) Colorare. Bacteriile folosesc albastru de metilen, iar sângele folosește soluție de colorare Wright. Soluția de colorare ar trebui să acopere întreaga suprafață de acoperire.
(7) Clătiți. Utilizați hârtie absorbantă pentru a absorbi sau a usca.
(8) Sigilați filmul. Conservare pe termen lung folosind folie de copac canadian.
2. Metoda de presare a tabletei
Metoda de compresie este o metodă de feliere a materialelor biologice prin plasarea lor între o lamă de sticlă și un capac, aplicând o anumită presiune pentru a dispersa celulele tisulare.
Procesul general al metodei de presare a tabletei:
(1) Selectarea materialului. Pentru a observa diviziunea celulară, celulele proaspete ale țesuturilor cu diviziune celulară viguroasă trebuie selectate ca materiale. Cum ar fi vârful rădăcinii, meristemul vârfului tulpinii, celulele măduvei osoase, antere (celule mamă polen). Cuiburile de spermatozoizi (spermatocite), etc.
(2) Fix. Fixarea materialului poate fi determinată în funcție de necesități, iar proba trebuie imediat comprimată și observată. Nu este necesar să se efectueze un tratament de fixare separat (sincron cu colorarea); Dacă materialul nu este inspectat imediat după prelevare, acesta poate fi fixat cu un fixativ (de obicei fixativ cu alcool acid acetic). După fixare timp de 2-24 ore (în funcție de material), clătiți cu etanol 95% și păstrați în etanol 70% pentru utilizare ulterioară.
(3) Separarea. Materialele care nu sunt ușor dispersate de celule trebuie tratate cu o soluție de separare prin hidroliză (cum ar fi HCl 1 N sau material seminal de acid clorhidric) timp de 6-20 de minute. După disociere, acestea trebuie clătite cu apă înainte de colorare.
(4) Colorare. Există multe tipuri de coloranți. Cromozomii sunt colorați în mod obișnuit cu soluție de colorare magenta cu acid acetic.
(5) Apăsați tableta. Așezați materialul pe o lamă de sticlă, adăugați o picătură de apă sau soluție de colorant, acoperiți lama cu un capac și apăsați ușor cu degetul mare.
(6) Observați. După compresie, poate fi observată la microscop.
