Punctele forte și limitele microscoapelor cu scanare laser multifotonice
Avantajele sunt următoarele:
1. Excitată de lumina roșie sau infraroșie, împrăștierea luminii este mică (împrăștierea particulelor mici este invers proporțională cu puterea a patra a lungimii de undă).
2. Nu este nevoie de găuri, capabile să colecteze mai mulți fotoni împrăștiați din secțiunea-transversală a imaginii.
3. Găurile nu pot distinge fotonii împrăștiați emiși din zonele defocalizate sau focale, iar multifotonii au un raport semnal-la-mai bun în imaginile profunde.
4. Lumina ultravioletă sau vizibilă utilizată pentru excitarea unui singur foton este ușor absorbită și atenuată de probă înainte ca fasciculul să atingă planul focal, ceea ce face dificilă excitarea straturilor profunde.
5. În ceea ce privește observarea la microscopie biologică, primul considerent este de a nu deteriora starea activă a organismului în sine și de a menține circulația apei, concentrația ionilor, oxigenul și nutrienții. În domeniul observării luminii, atât energia termică, cât și cea fotonică trebuie să rămână în doza de iradiere și energia luminoasă care nu dăunează celulelor.
6. Microscopia multifotonica are, de asemenea, multe avantaje. În ceea ce privește rezoluția tri-dimensională, invazia adâncimii, eficiența împrăștierii, lumina de fundal, raportul semnal-la{-zgomot, control etc., microscoapele laser au caracteristici de neegalat sau superioare pe care microscoapele laser anterioare nu le posedau.
Microscopul de scanare laser confocal multifotonic a fost extins la diverse domenii de cercetare și aplicații. Poate efectua observații tridimensionale nedistructive pe probe în starea lor naturală și poate îmbunătăți rezoluția și raportul semnal-la-zgomot al sistemului. atins, care are valoare de aplicație mare. Se poate crede că, odată cu dezvoltarea ulterioară a tehnologiilor mecanice, materiale și laser legate de microscopia confocală multifoton, microscopia de scanare laser confocală multifoton va avea o dezvoltare mai mare și aplicații mai largi
Dezavantajele sunt următoarele:
1. Numai pentru imagistica cu fluorescență.
2. Dacă proba include cromofori care pot absorbi lumina de excitație, cum ar fi pigmenții, eșantionul poate fi supus daunelor termice.
3. Rezoluția este ușor redusă, deși poate fi îmbunătățită prin utilizarea simultană a găurilor mici confocale, va exista pierdere de semnal.
4. Datorită limitărilor laserelor ultrarapide scumpe, costul microscoapelor cu scanare multifotoni este relativ mare.
