Metode și etape de prelucrare a probelor pentru microscopia electronică
Înainte de a utiliza un microscop electronic cu transmisie pentru a observa probe biologice, probele trebuie preprocesate. Oamenii de știință folosesc diferite metode de procesare, după cum necesită diferite cerințe de cercetare.
Fixare: Pentru a conserva cât mai mult eșantionul, se folosește glutaraldehida pentru a întări specimenul și acidul osmic este folosit pentru colorarea grăsimii.
Fixare la rece: Proba este înghețată rapid în etan lichid, astfel încât apa să nu cristalizeze și să formeze gheață amorfă. Mostrele conservate în acest fel au mai puține daune, dar contrastul imaginii este foarte scăzut.
Deshidratare: Folosiți etanol și acetonă pentru a înlocui apa.
Căptușit: eșantionul poate fi împărțit după ce este căptușit.
Segmentare: Proba este tăiată în felii subțiri folosind o lamă de diamant.
Colorare: Atomii grei, cum ar fi plumbul sau uraniul, împrăștie electronii mai puternic decât atomii mai ușori și, prin urmare, pot fi utilizați pentru a crește contrastul.
Înainte de a utiliza un microscop electronic cu transmisie pentru a observa metalele, proba trebuie să fie
Viruși la microscop electronic
Tăierea în felii foarte subțiri (aproximativ 0,1 mm) și apoi folosirea lustruirii electrolitice pentru a continua subțierea metalului sfârșește adesea prin a forma o gaură în centrul probei în care electronii pot trece prin metalul foarte subțire de acolo. Metalele care nu pot fi lustruite electrolitic sau materialele care sunt neconductoare sau au o conductivitate slabă, cum ar fi siliciul, sunt în general subțiate mecanic și apoi procesate folosind lovirea ionică. Pentru a preveni ca probele neconductoare să acumuleze electricitate statică într-un microscop electronic cu scanare, suprafețele lor trebuie acoperite cu un strat conductiv.
De ce microscoapele electronice au o rezoluție mai mare?
După cum sugerează și numele, așa-numitul microscop electronic este un microscop care utilizează fascicule de electroni ca sursă de iluminare. Deoarece fasciculul de electroni se poate îndoi sub acțiunea unui câmp magnetic extern sau a unui câmp electric, formând un fenomen de refracție similar cu cel al luminii vizibile care trece prin sticlă, putem folosi acest efect fizic pentru a crea o „lentila” pentru fasciculul de electroni, astfel dezvoltarea unui microscop electronic. Caracteristica unui microscop electronic cu transmisie (TEM) este că folosim fascicule de electroni care trec prin eșantion la imagine, ceea ce este diferit de un microscop electronic cu scanare (Scanning Electron Microscope, SEM). Deoarece lungimea de undă a undelor de electroni este mult mai mică decât lungimea de undă a luminii vizibile (lungimea de undă a undelor de electroni de 100kV este de 0,0037 nm, în timp ce lungimea de undă a luminii violete este de 400 nm), conform opticii Teoretic, ne putem aștepta ca puterea de rezoluție a microscoapelor electronice să fie mult mai bună decât cea a microscoapelor optice. De fapt, capacitatea de rezoluție a microscoapelor electronice moderne a ajuns la 0,1 nm. Manualul opțional de fizică pentru elevii de liceu îl explică mai detaliat (informații mici din spatele efectului fotoelectric)
