Principiile și caracteristicile structurale ale microscopului fluorescent
Microscopul cu fluorescență folosește o sursă de lumină cu punct extrem de eficient pentru a emite o anumită lungime de undă a luminii (cum ar fi lumina ultravioletă 3650 sau lumina albastru violet 4200) printr -un sistem de filtrare a culorilor ca lumină de excitație, care excită substanțele fluorescente din eșantion pentru a emite diverse culori de fluorescență, apoi observă prin mărirea lentilelor obiective și a ochiului. În acest fel, chiar și cu fluorescență slabă într -un fundal puternic, este ușor de recunoscut și are o sensibilitate ridicată. Este utilizat în principal pentru studiul structurii, funcției și compoziției chimice celulare. Structura de bază a unui microscop cu fluorescență este compusă dintr -un microscop optic regulat și unele accesorii, cum ar fi o sursă de lumină fluorescentă, filtru de excitație, divizor de fascicul de culoare dublă și filtru de blocare. Sursa de lumină fluorescentă - folosește de obicei lămpi de mercur cu presiune ultra -ridicată (50-200 W), care pot emite lumină de diferite lungimi de undă, dar fiecare substanță fluorescentă are o lungime de undă de lumină de excitație care produce fluorescență puternică. Prin urmare, trebuie adăugate filtre de excitație (de obicei ultraviolete, violet, albastru și de excitație verde) pentru a permite doar o anumită lungime de undă a luminii de excitație să treacă și să iradiaze eșantionul, în timp ce absorbând toate celelalte lumini. După ce a fost iradiat cu lumină de excitație, fiecare substanță emite fluorescență vizibilă cu o lungime de undă mai lungă decât lungimea de undă de iradiere într -o perioadă foarte scurtă de timp. Fluorescența are specificitate și este, în general, mai slabă decât lumina de excitație. Pentru a observa fluorescență specifică, trebuie adăugat un filtru de blocare (sau suprimare) în spatele obiectivului obiectiv. Funcțiile sale sunt duble: în primul rând, pentru a absorbi și bloca lumina de excitație să intre în ocular pentru a evita tulburarea fluorescenței și deteriorarea ochilor; În al doilea rând, pentru a selecta și a permite trecerea fluorescenței specifice, prezentând o culoare fluorescentă specifică. Două tipuri de filtre trebuie utilizate în combinație.
