Introducere în alegerea între microscoape inversate și microscoape cu fluorescență
Microscopul este un instrument important în cultura celulară și experimentele derivate aferente. În prezent, pe piață există diverse tipuri de microscoape, iar alegerea unui microscop care să răspundă nevoilor și să fie potrivit este o provocare. Mai jos, vom introduce principiile microscoapelor inversate și microscoapelor cu fluorescență pentru o selecție ușoară.
Compoziția unui microscop inversat este aceeași cu cea a unui microscop obișnuit, constând în principal din trei părți: partea mecanică, partea de iluminare și partea optică. Compoziția unui microscop inversat este aceeași cu a unui microscop vertical obișnuit, cu excepția faptului că lentila obiectivului și sistemul de iluminare sunt inversate, primul sub scenă și cel din urmă deasupra scenă. Această structură permite o creștere semnificativă a distanței efective dintre sistemul de focalizare de iluminare și scenă, facilitând amplasarea instrumentelor de observare mai groase, cum ar fi vase de cultură și sticle de cultură celulară (desigur, lamele de sticlă sunt, de asemenea, acceptabile), în timp ce distanța de lucru dintre lentila obiectivului și material nu trebuie să fie foarte mare. Microscopul inversat este folosit de instituțiile medicale și de sănătate, universități și institute de cercetare pentru observarea microorganismelor, celulelor, bacteriilor, culturilor de țesuturi, suspensiilor, sedimentelor etc. Poate observa continuu procesul de reproducere și diviziune celulară și bacteriană în mediul de cultură și poate capta orice stare în timpul acestui proces. Folosit pe scară largă în domenii precum citologie, parazitologie, oncologie, imunologie, inginerie genetică, microbiologie industrială, botanică etc.
Microscopia cu fluorescență este utilizată pentru a studia absorbția, transportul, distribuția și localizarea substanțelor în interiorul celulelor. Pentru obiectul testat, există două moduri de a genera fluorescență: fluorescența spontană, care emite direct fluorescență după iradierea UV; Fluorescența secundară apare atunci când obiectul observat este tratat cu coloranți fluorescenți și apoi iradiat cu lumină ultravioletă pentru a emite fluorescență. Unele substanțe din celule, cum ar fi clorofila, produc fluorescență spontană atunci când sunt expuse la radiații ultraviolete; Unele substanțe în sine nu pot emite fluorescență, dar dacă sunt colorate cu coloranți fluorescenți sau cu anticorpi fluorescenți, pot emite și fluorescență secundară după ce au fost iradiate cu lumină ultravioletă. Microscopul cu fluorescență folosește o sursă de lumină punctiformă foarte eficientă pentru a emite o anumită lungime de undă a luminii (lumină ultravioletă 365nm sau lumină albastră violet 420nm) printr-un sistem de filtru color ca lumină de excitație, care excită substanțele fluorescente din interiorul specimenului pentru a emite diferite culori de fluorescență și apoi observă prin mărirea lentilei obiectivului și a ocularului. În acest fel, chiar și cu fluorescență slabă pe un fundal puternic, este ușor de recunoscut și are o sensibilitate ridicată. Este folosit în principal pentru studiul structurii, funcției și compoziției chimice celulare.
