Cum se reglează intensitatea laserului unui microscop confocal cu scanare laser
Există doi factori de ajustare pentru intensitatea laserului: butonul de control al puterii și filtrul de reglaj acustic-optic (AOTF)
1. Buton de control al puterii: Setat în general la 30% din valoarea maximă. Creșterea puterii va scurta durata de viață a laserului și va genera zgomot laser. AOTF, PMT etc. trebuie ajustate mai întâi pentru a obține cea mai bună intensitate.
2. Filtru ajustabil acusto optic: controlează fasciculul luminii de excitație și intensitatea și poate porni sau opri laserul sau îl poate regla între 0-100% în milisecunde. Acest lucru permite utilizarea diferitelor fascicule laser pentru fiecare punct de imagine și selectarea intensității necesare.
Principiul de funcționare: Utilizează efectul de difracție Bragg al undelor sonore care se propagă în diferite medii asupra difracției Bragg incidente în mediul de propagare. Când este introdusă o anumită frecvență a semnalului RF, AOTF difractează lumina policromatică incidentă și selectează lumina monocromatică cu lungimea de undă a intrării. Lungimea de undă a luminii monocromatice corespunde unu-la-unu cu frecvența RF f. Atâta timp cât semnalul electric este reglat, lungimea de undă de ieșire poate fi schimbată rapid și aleatoriu. AOTF realizează ajustarea continuă a intensității laserului și are funcție de ajustare rapidă, realizând stimularea și scanarea locală, comutarea rapidă a lungimii de undă (nivel de microsecunde). În microscopia confocală cu laser, tuburile fotomultiplicatoare nu pot crește intensitatea laserului, dar pot regla intensitatea luminii post-imaging. Prin urmare, prin ajustarea tensiunii tubului fotomultiplicator, luminozitatea imaginii poate fi ajustată. În plus, dimensiunea orificiului focal afectează cantitatea de fotoni și poate ajusta, de asemenea, luminozitatea imaginii. Un tub fotomultiplicator este un tub cu vid special care este extrem de sensibil la lumina ultravioletă, vizibilă și aproape de-infraroșu. Poate spori semnalul luminos slab primit de 108 ori, permițând măsurarea semnalului luminos.
