Abilități și metode de microscopie cu fluorescență
Microscop cu fluorescență Parametri tehnici 1. Ocular cu unghi larg 2. Obiectiv acromatic 3. Convertor lentilă obiectiv cu patru orificii 4. Dispozitiv de epifluorescență Albastru (B) Verde (G) Sistem de excitare 10Lampa cu mercur 0W 5. Mecanism coaxial de reglare a focalizării grosiere și fine: Reglați intervalul de focalizare: 15mm Valoarea grilei de micro-mișcare: 0,002 mm 6. Masă mecanică cu două straturi Interval de mișcare longitudinală: 70 mm Interval de mișcare laterală: 50 mm
Parametrii tehnici ai microscopului cu fluorescență
1. Ocular cu unghi larg
2. Obiectiv acromatic
3. Nasul cu patru deschideri
4. Dispozitiv de epifluorescență albastru (B) verde (G) sistem de excitare lampă cu mercur de 100 W
5. Mecanism coaxial de reglare a focalizării grosiere și fine: interval de focalizare 15 mm valoarea grilei de mișcare fină 0.002 mm
6. Banc de lucru mecanic cu două straturi
Interval de mișcare verticală: 70 mm Interval de mișcare laterală: 50 mm
Abilități și metode de microscopie cu fluorescență
(1) Lamă de sticlă
Grosimea lamei de sticlă trebuie să fie între 0,8 și 1,2 mm. O lamă prea groasă va absorbi mai multă lumină pe de o parte, iar pe de altă parte, lumina de excitație nu poate fi concentrată pe specimen. Lamelele trebuie să fie netede, uniforme ca grosime și fără autofluorescență evidentă. Uneori se folosesc lamele de sticlă de cuarț.
(2) Sticlă de acoperire
Grosimea geamului de acoperire este de aproximativ 0,17 mm, netedă. Pentru a întări lumina de excitație, se poate folosi și o sticlă de acoperire de interferență, care este o sticlă de acoperire specială acoperită cu mai multe straturi de substanțe (cum ar fi fluorură de magneziu) care au efecte de interferență diferite asupra luminii de diferite lungimi de undă, ceea ce poate face ca fluorescența merge fără probleme. Lumina excitantă este trecută și reflectată, iar această lumină de excitație reflectată excită specimenul.
(3) Exemplar
Feliile de țesut sau alte specimene nu trebuie să fie prea groase. Dacă este prea gros, cea mai mare parte a luminii de excitație va fi consumată în partea inferioară a specimenului, în timp ce partea superioară observată direct de lentila obiectiv nu va fi pe deplin excitată. În plus, suprapunerea celulelor sau acoperirea cu impurități afectează judecata.
(4) Agent de montaj
Glicerina este folosită în mod obișnuit ca agent de montare, care trebuie să nu aibă autofluorescență, incoloră și transparentă, iar luminozitatea fluorescenței este mai strălucitoare la pH 8.5-9,5 și nu este ușor să se estompeze rapid. Prin urmare, un amestec egal de glicerol și soluție tampon de carbonat de 0,5 mol/l cu un pH de 9,0 până la 9,5 este utilizat în mod obișnuit ca agent de montare.
(5) ulei de oglindă
În general, atunci când se observă specimene cu microscoape cu fluorescență cu câmp întunecat și lentile cu imersie în ulei, trebuie utilizat ulei de imersie. Cel mai bine este să folosiți ulei special de imersie nefluorescent. În schimb, se poate folosi și glicerina de mai sus și se poate folosi și parafină lichidă, dar indicele de refracție este scăzut, ceea ce are un impact ușor asupra calității imaginii. Influență.
