Metoda de numărare directă a microorganismelor folosind un microscop
Utilizarea unui hemocitometru pentru a număra direct microorganismele la microscop este o metodă frecvent utilizată pentru numărarea microbilor. Avantajul acestei metode este intuitivitatea și viteza. Puneți suspensia bacteriană (sau suspensia de spori) diluată corespunzător în camera de numărare între lama hemocitometrului și lama de acoperire și numărați la microscop. Datorită volumului constant al camerei de numărare (0,1 mm2), numărul total de microorganisme pe unitatea de volum poate fi convertit în funcție de numărul de microorganisme observate la microscop. Datorită faptului că această metodă calculează suma celulelor bacteriene vii și moarte, este cunoscută și ca metoda numărului total de bacterii.
O placă de numărare a celulelor sanguine este de obicei o lamă de sticlă special concepută, cu patru caneluri care formează trei platforme. Platforma din mijloc este împărțită în jumătate de o canelură orizontală scurtă, iar fiecare parte a platformei este gravată cu o grilă. Fiecare grilă este împărțită în nouă pătrate mari, iar pătratul mare din mijloc este camera de numărare, unde se efectuează numărarea microbiană. Structura plăcii de numărare a celulelor sanguine este prezentată în Figura VIII-1.
În general, există două specificații pentru scara camerei de numărare. Unul este că un pătrat mare este împărțit în 16 pătrate din mijloc, iar fiecare pătrat din mijloc este împărțit în continuare în 25 de pătrate mici (Figura VIII -2); O altă metodă este împărțirea unui pătrat mare în 25 de pătrate din mijloc, iar fiecare pătrat din mijloc este împărțit în continuare în 16 pătrate mici (Figura VIII -1, C). Dar, indiferent de dimensiunea tablei de numărare, numărul de pătrate mici din fiecare pătrat mare este același, adică 16 × 25=400 pătrate mici, așa cum se arată în Figura VIII-2.
Dacă lungimea laturii fiecărui pătrat mare este de 1 mm, aria fiecărui pătrat mare este de 1 mm2. După acoperirea cu o sticlă de acoperire, înălțimea dintre diapozitiv și sticla de acoperire este de 0,1 mm, deci volumul camerei de numărare este de 0,1 mm3.
La numărare, se numără de obicei numărul total de bacterii din cinci pătrate și apoi se obține valoarea medie a fiecărui pătrat. Înmulțirea acestuia cu 16 sau 25 dă numărul total de bacterii dintr-un pătrat mare, care este apoi convertit în numărul total de bacterii din 1 ml de soluție bacteriană.
