Diferența dintre microscopul obișnuit cu lumină și microscopul cu fluorescență
Microscop optic: este un instrument optic care folosește principii optice pentru a mări și imagine obiecte minuscule care nu pot fi rezolvate de ochiul uman, astfel încât oamenii să poată extrage informații despre microstructură.
Microscop cu fluorescență: microscopul cu fluorescență folosește lumina ultravioletă ca sursă de lumină pentru a iradia obiectul supus inspecției pentru a-l face să emită fluorescență și apoi să observe forma și locația obiectului la microscop. Microscopia cu fluorescență este folosită pentru a studia absorbția și transportul substanțelor în celule, distribuția și localizarea substanțelor chimice etc. Unele substanțe din celule, cum ar fi clorofila, pot avea fluorescență după ce au fost iradiate de razele ultraviolete; deși unele substanțe în sine nu pot fluoresce, ele pot fi fluorescente și după ce au fost colorate cu coloranți fluorescenți sau cu anticorpi fluorescenți după ce au fost iradiate de raze ultraviolete. Microscopia cu fluorescență este unul dintre instrumentele cercetării calitative și cantitative asupra unor astfel de substanțe.
Un microscop optic constă în general dintr-o scenă, un sistem de iluminare reflector, o lentilă obiectiv, un ocular și un mecanism de focalizare. Prin schimbarea metodei de iluminare, sistemul de iluminare reflector poate obține diferite metode de observare, cum ar fi puncte de obiect întunecate pe un fundal luminos (numit iluminare în câmp luminos) sau puncte de obiect luminoase pe fundal întunecat (numit iluminare în câmp întunecat), pentru a descoperi mai bine. și observați microstructurile în diferite situații.
Microscoapele cu fluorescență diferă de microscoapele obișnuite în următoarele moduri:
1. Metoda de iluminare este de obicei episcopică, adică sursa de lumină este proiectată pe probă prin lentila obiectivului;
2. Sursa de lumină este lumină ultravioletă, lungimea de undă este mai scurtă și rezoluția este mai mare decât cea a microscoapelor obișnuite;
3. Există două filtre speciale, cel din fața sursei de lumină este folosit pentru a filtra lumina vizibilă, iar cel dintre ocular și lentila obiectiv este folosit pentru a filtra razele ultraviolete pentru a proteja ochiul uman.
Microscopul cu fluorescență este, de asemenea, un fel de microscop optic, principala diferență este că lungimea de undă de excitație a celor două este diferită. Aceasta determină diferența dintre microscopul cu fluorescență și microscopul optic obișnuit în ceea ce privește structura și utilizarea.
Microscopia cu fluorescență este un instrument esențial în citochimia imunofluorescentă. Este compus din componente principale, cum ar fi sursa de lumină, sistemul cu plăci de filtrare și sistemul optic. Este de a folosi o anumită lungime de undă a luminii pentru a excita specimenul să emită fluorescență și pentru a observa imaginea de fluorescență a specimenului prin amplificarea lentilei obiectivului și a sistemului de ocular.
