Determinarea numărului de microorganisme - metoda microscopică de numărare directă!
Fundamental
Metoda microscopică de numărare directă este o metodă simplă, rapidă și intuitivă de plasare a unei cantități mici din suspensia probei care urmează să fie testată pe o lamă de sticlă specială (cunoscută și sub numele de contor de bacterii) cu o zonă și un volum definite și de numărare direct sub un microscop. În prezent, contoarele de bacterii utilizate în mod obișnuit în țară și în străinătate includ: panoul de numărare a celulelor sanguine, contorul de bacterii Peteroff-Hauser și contorul de bacterii Hawksley, etc. Toate pot fi folosite pentru a număra suspensii precum drojdia, bacteriile și sporii de mucegai și principiile de bază sunt aceleași. Ultimele două contoare de bacterii au un volum total de 0.02 mm3 după ce au fost acoperite cu un capac de sticlă, iar distanța dintre capacul de sticlă și lamă este de numai 0,02 mm, deci celule mici, cum ar fi bacteriile pot fi observate și numărate cu un obiectiv cu imersie în ulei. Pe lângă utilizarea acestor contoare de bacterii, există și o metodă de estimare de observare directă a raportului dintre zona frotiului și zona câmpului vizual la microscop. Această metodă este utilizată în general pentru examinarea bacteriologică a laptelui. Avantajul metodei de numărare directă cu microscop este că este intuitivă, rapidă și ușor de utilizat. Dar dezavantajul acestei metode este că rezultatele măsurate sunt de obicei suma bacteriilor moarte și vii. În prezent, există câteva metode pentru a depăși acest neajuns, cum ar fi combinarea culturii microcamerale de colorare a bacteriilor vii (timp scurt) și adăugarea de inhibitori ai diviziunii celulare pentru a atinge scopul de a număra numai bacteriile vii.
În acest experiment, un hemocitometru a fost folosit ca exemplu pentru a efectua numărarea directă la microscop. Pentru metodele de utilizare ale celorlalte două contoare de bacterii, vă rugăm să consultați instrucțiunile fiecărui producător. Numărarea directă la microscop cu un hemocitometru este o metodă de numărare microbiană utilizată în mod obișnuit. Tabla de numărare este o lamă de sticlă special realizată, pe care patru fante formează trei platforme; platforma mai lată din mijloc este împărțită în două jumătăți printr-o fantă orizontală scurtă, iar fiecare parte a platformei este căptușită cu o grilă. Fiecare grilă este împărțită în nouă pătrate mari, iar pătratul mare din mijloc este camera de numărare. Scara camerei de numărare are în general două specificații, una este că un pătrat mare este împărțit în 25 de pătrate din mijloc, iar fiecare pătrat din mijloc este împărțit în 16 pătrate mici; celălalt este că un pătrat mare este împărțit în 16 pătrate din mijloc și fiecare pătrat din mijloc este împărțit în 25 de pătrate mici, dar indiferent de ce fel de tablă de numărare, există 400 pătrate mici în fiecare pătrat mare. Lungimea laterală a fiecărui pătrat mare este de 1 mm, iar apoi aria fiecărui pătrat mare este de 1 mm 2. După ce capacul de sticlă este acoperit, înălțimea dintre capacul de sticlă și sticla glisică este de 0,1 mm, deci volumul camera de numărare este de 0,1 mm (o zece miiime dintr-un mililitru).
