Ajustarea sistemului de cale optică imagistică al microscopului luminos și schița examinării microscopice

Ajustarea sistemului de cale optică imagistică al microscopului luminos și schița examinării microscopice

Ajustarea sistemului de cale optică de imagistică și schița de examinare microscopică

Reglarea sistemului optic de imagistică al unui microscop se realizează în funcție de nevoile diferitelor tehnici de microscopie. Așa-numita microscopie, pe scurt, este metoda de iluminare folosită la observarea unei probe prin microscop, precum și tehnica și metoda de obținere a unui contrast mai bun în imaginea formată de eșantion. Următoarele descriu pe scurt microscopia sa maturizat în mai multe metode și metoda corespunzătoare de ajustare a sistemului optic de imagistică la microscop.

1. Câmp luminos de transmisie:
Aceasta este cea mai tradițională și comună metodă de aplicare de la inventarea microscopului. Componente de bază: a. Lentila obiectiv: orice lentila obiectiv poate fi folosita pentru observarea in camp luminos; b. Lunetă: pot fi folosite tot felul de lunete, de preferință echipate cu diafragmă de deschidere. Metoda de ajustare: După ce sistemul de iluminare Kuhler al microscopului de mai sus este ajustat, se poate aplica metoda câmpului luminos. Domeniul de aplicare: toate secțiunile de țesut colorate, frotiuri de sânge etc. Precauții: a. Când se utilizează metoda de observare a câmpului luminos, sistemul de iluminare Kuhler trebuie ajustat; b. Diafragma câmpului vizual nu trebuie deschisă în mod arbitrar, iar lentila frontală a oglinzii condensatorului ar trebui să fie poziționată efectiv în afara și, respectiv, în calea optică atunci când se utilizează lentile obiective de 10×, mai puțin de 10× și mai mult de 10. ×; c. Diafragma de deschidere a oglinzii condensatorului nu trebuie utilizată pentru a regla luminozitatea câmpului vizual, iar înălțimea oglinzii condensatorului nu trebuie ajustată fără discriminare, sau rezoluția microscopului va fi scăzută și rezoluția țesutului colorat. va fi deteriorat. rezoluția microscopului și deteriorarea a fost ajustată la sistemul de iluminare Kuhler; d. pentru micrografii, la fiecare modificare în utilizarea unei măriri a lentilei obiectiv, trebuie să ajustați diafragma de deschidere a lentilei condensatorului, astfel încât dimensiunea acesteia să fie exact egală cu deschiderea numerică utilizată în obiectivul de 2 / 3.

2. Metoda contrastului de fază a luminii transmise:
Aceasta este o examinare modernă cu microscopul unei metode de îmbunătățire a contrastului. Componente de bază: obiectiv cu contrast de fază, câmp vizual luminos și lunetă multifuncțională cu contrast de fază, telescop de focalizare, filtre verzi.

Metode de ajustare:
A. Pe baza ajustării sistemului de iluminare Kuhler, focalizați eșantionul în mod clar utilizând metoda câmpului luminos

b. Rotiți luneta la Ph1 pentru a alinia poziția scalei cadranului, alegeți lentila obiectiv cu contrast de fază de 10 × și înlocuiți proba transparentă care trebuie observată.

c. Deconectați unul dintre oculare, înlocuiți-l cu un telescop centrat și focalizați pe cele două inele de contrast de fază din câmpul vizual (inelul negru de contrast de fază al lentilei obiectiv și inelul de contrast de fază de transmisie a luminii al lentilei condensatorului).

d. Este posibil ca cele două inele de contrast de fază din câmpul vizual să nu coincidă neapărat, reglați cele două dispozitive de reglare pe lunetă (reglarea pozițiilor din stânga și dreapta ale pârghiei de reglare a inelului de contrast de fază și reglați pozițiile față și spate ale butonului de frecare) , astfel încât inelul de transmisie a luminii pentru față și spate la dreapta și la stânga să coincidă cu inelul negru

e. După ajustare, treceți înapoi la ocular pentru observare și apăsați filtrul verde pe calea optică pentru a observa imaginea cu contrast de fază a probei.

f. Când există lentile obiective de 20× și 40× pentru observare, lentila de spotting trebuie să fie setată în poziția Ph2, iar când se utilizează 100 de lentile obiectiv, lentila de spotting trebuie setată în poziția Ph3.

Domeniul de aplicare: Este potrivit pentru observarea probelor transparente, necolorate sau necolorate, cum ar fi tot felul de celule, țesuturi vii, secțiuni de țesut necolorate sau necolorate, organisme acvatice și așa mai departe.

3. Metoda de contrast de fază de interferență diferențială:
Pentru a depăși metoda contrastului de fază de observare a detaliilor probei din jurul imaginii însoțite de un halou, se va masca detaliile care ar fi trebuit să fie văzute, precum și probele sau secțiunile de țesut necesită o grosime destul de subțire, în principiu, poate să fie mai gros de 10?m și alte limitări, utilizarea principiului interferenței cu fascicul dublu pentru a proiecta metoda de contrast de fază de interferență sub-diferențială.

Metode de ajustare:
A. Metoda DIC trebuie ajustată pe baza faptului că sistemul Kulemin a fost deja ajustat

b. Folosind o lentilă obiectiv de 10×, determinați poziția de focalizare a obiectivului care poate vedea eșantionul în mod clar cu un câmp vizual luminos.

c. Plasați polarizatorul pe calea de iluminare, observând că ar trebui să fie orientat în direcția est-vest.

d. Rotiți selectorul condensatorului în poziția corespunzătoare utilizării obiectivului de 10 ×, adică DIC 0.3-0.4.

e. Introduceți glisorul DIC pentru obiectivul de 10× în partea din spate a obiectivului sau pe convertorul obiectivului.

f. Introduceți analizorul în calea optică a imaginii și rețineți că orientarea acestuia ar trebui să fie sud-nord.

g. Înlocuiți proba transparentă care trebuie observată, porniți sursa de lumină pentru a focaliza în mod clar proba.

h. Reglați inserția DIC astfel încât imaginea de contrast de interferență diferențială să obțină cel mai bun efect, adică cel mai evident efect de relief.

i. În același timp, reglați diafragma de deschidere a oglinzii condensatorului, astfel încât efectul de contrast să fie și optim.

j. Apoi ajustați detaliile eșantionului pentru a vedea structura eșantionului la diferite niveluri.

k. Dacă este introdusă culoarea complementară (placă de întârziere roșie de ordinul întâi) și inserția DIC este reglată în același timp, culorile strălucitoare în continuă schimbare pot fi văzute în câmpul vizual, cu roșu, portocaliu, galben, verde, albastru, violet, roz, roz-violet și galben-auriu. Domeniul de aplicare: secțiuni de țesut transparente sau nestinabile, grosime de până la aproximativ 100 m, țesut viu și celule vii în cultură, organisme vii mici și așa mai departe.