Ce este microscopia în câmp întunecat? Cât de mică poate fi văzută o celulă?
Microscopul în câmp întunecat este un tip de microscop optic, numit și ultramicroscop. Există un scut de lumină în centrul condensatorului unui microscop cu câmp întunecat, astfel încât lumina de iluminare să nu intre direct în lentila umană. Doar lumina reflectată și difractată de specimen poate pătrunde în lentila obiectivului. Prin urmare, fundalul câmpului vizual este negru, iar marginile obiectelor sunt luminoase. de. Acest tip de microscop poate vedea particule de până la 4 ~ 200 nm, iar rezoluția poate fi de 50 de ori mai mare decât cea a microscoapelor obișnuite.
principiu
Microscopul în câmp întunecat este modificat pe baza structurii microscopului optic obișnuit, utilizând principiul efectului optic Tyndall. Condensatoarele de câmp întunecat permit blocarea fasciculului central al sursei de lumină. Nu este posibilă intrarea în lentila obiectivului prin specimen de jos în sus. Ca urmare, lumina își schimbă calea și iradiază oblic asupra specimenului observat. Exemplarul este reflectat sau împrăștiat atunci când întâlnește lumina. Lumina împrăștiată este aruncată în lentila obiectivului, astfel încât întregul câmp vizual este întunecat.
Principiul de bază al microscopiei în câmp întunecat este efectul Tyndall. Când un fascicul de lumină trece printr-o cameră întunecată, o „cale” strălucitoare a prafului poate fi observată în aer din direcția perpendiculară pe lumina incidentă. Acest fenomen este efectul Tyndall. După ce un microscop cu câmp întunecat este înlocuit cu un condensator cu câmp întunecat pe un microscop optic obișnuit, din cauza ocluziei structurii parabolice interne a condensatorului, lumina care iradiază pe suprafața obiectului de inspectat nu poate pătrunde direct în obiectiv. lentila și ocularul și numai lumina împrăștiată poate trece, reducând astfel câmpul vizual. este întuneric. Deoarece microscopul cu câmp întunecat nu emite lumină transparentă în sistemul de observare directă, atunci când nu există niciun obiect, câmpul de vedere este întunecat și este imposibil de observat orice obiect; când există un obiect, lumina difractată înapoi de obiect și lumina împrăștiată sunt vizibile puternic pe fundalul întunecat. . Când se observă un obiect într-un câmp întunecat, cea mai mare parte a luminii de iluminare este refractă. Datorită locației, structurii și grosimii obiectului (specimenului), împrăștierea și refracția luminii variază foarte mult.
Structura si modificarea
Structura de bază a unui microscop cu câmp întunecat este un set optic de microscop obișnuit plus o barieră de lumină. Un microscop obișnuit poate fi transformat într-un microscop cu câmp întunecat atâta timp cât condensatorul este detașabil și diametrul suportului este potrivit pentru instalarea unui condensator cu câmp întunecat. Când nu există un condensator de câmp întunecat, puteți utiliza hârtie neagră groasă pentru a face un scut central de lumină și îl puteți plasa pe cadrul filtrului sub condensatorul unui microscop obișnuit pentru a obține efectul de câmp întunecat. Scutul de lumină este folosit pentru a bloca lumina în mijlocul sursei de lumină, astfel încât lumina să poată pătrunde în specimen doar din împrejurimi. Dimensiunea este aproximativ aceeași cu dimensiunea diafragmei. Diferitele măriri folosesc deschideri diferite, așa că trebuie făcute blocuri de lumină diferite.
Aplicație practică
Microscopia câmpului întunecat este adesea folosită pentru a observa probe transparente necolorate. Deoarece aceste mostre au un indice de refracție similar cu cel al mediului înconjurător, ele sunt greu de văzut clar în condiții obișnuite de câmp luminos. Prin urmare, condițiile de câmp întunecat sunt utilizate pentru a îmbunătăți contrastul dintre eșantion în sine și fundal. Acest tip de microscop poate vedea particule de până la 4 ~ 200 nm. Poate vedea doar existența, mișcarea și caracteristicile de suprafață ale obiectului, dar nu poate distinge structura fină a obiectului. Din punct de vedere clinic, microscopia câmpului întunecat este folosită în mod obișnuit pentru a examina spirochetele palide. Acesta este un test de patogen, care este de mare importanță pentru diagnosticul sifilisului precoce.
