Ce este un microscop cu contrast de fază
Un microscop cu contrast de fază este un microscop care poate converti diferența de fază (sau diferența de cale optică) generată atunci când lumina trece printr-un obiect într-o schimbare a amplitudinii (intensitatea luminii). Folosit în principal pentru observarea celulelor vii, a secțiunilor de țesut necolorate sau a specimenelor colorate fără contrast.
Ochiul uman poate distinge doar modificări ale lungimii de undă (culoare) și amplitudinii luminii vizibile, dar nu poate distinge schimbările de fază. Majoritatea specimenelor biologice sunt foarte transparente, iar amplitudinea undelor luminoase rămâne practic neschimbată după trecere, cu doar schimbări de fază.
Microscopul cu contrast de fază convertește practic diferența de cale optică a luminii vizibile care trece prin specimen în diferență de amplitudine, îmbunătățind astfel contrastul dintre diferitele structuri și făcându-le clare și vizibile. Lumina se refractă prin eșantion, deviând de la calea inițială a luminii și fiind întârziată cu 1/4 λ (lungime de undă), dacă crește sau scade în continuare cu 1/4 λ, atunci diferența de cale optică devine 1/2 λ, interferența dintre cele două axe fotosintetice se întăresc, iar amplitudinea crește sau scade, mărind contrastul.
Din punct de vedere structural, diferența dintre microscopia cu contrast de fază și microscopia optică obișnuită constă în:
1. Deschidere inelară O diafragmă cu o deschidere circulară, instalată între sursa de lumină și condensator, pentru a forma un con gol de lumină care trece prin condensator și a-l focaliza pe specimen.
2. Microscopul cu diferență de fază a adăugat o placă de fază acoperită cu fluorură de magneziu în interiorul lentilei obiectivului pentru a întârzia faza luminii directe sau difractate cu 1/4 λ. Există două zone pe placa de fază, partea prin care trece lumina directă se numește „suprafața conjugată”, iar partea prin care trece lumina difractată se numește „suprafața de compensare”. Placa de fază este împărțită în două tipuri în funcție de efectul său de lucru:
(1) O placă de fază plus: întârzie lumina directă cu 1/4 λ, După combinarea a două seturi de unde luminoase, amplitudinea undelor luminoase crește, iar structura specimenului devine mai strălucitoare decât mediul înconjurător, formând un contrast luminos (cunoscut și ca contrast negativ).
(2) B plus placa de fază: întârzierea luminii de difracție cu 1/4 λ, După ce cele două seturi de raze luminoase se îmbină, undele luminoase se scade și amplitudinea scade, rezultând o structură a specimenului mai întunecată decât mediul înconjurător, formând un contrast întunecat (cunoscut și ca contrast pozitiv). Un obiectiv cu o placă de fază se numește obiectiv cu contrast de fază, iar cuvântul „Ph” este adesea folosit pe carcasa exterioară a obiectivului.
