Structura de bază a unui microscop și modul în care funcționează o lentilă de ulei
Microscoapele optice generale moderne utilizează un sistem de două lentile, un ocular și o lentilă obiectiv, pentru a mări imaginea și sunt adesea denumite microscoape compuse. Ele sunt compuse din două părți majore: dispozitivul mecanic și sistemul optic. În sistemul optic al microscopului, performanța lentilei obiectiv este cea mai critică, ceea ce afectează direct rezoluția microscopului. Dintre cele mai multe tipuri de lentile obiectiv utilizate în mod obișnuit în microscoapele optice generale, lentila de ulei are cea mai mare mărire și este cea mai importantă pentru cercetarea microbiologică. În comparație cu alte lentile obiective, utilizarea lentilelor de ulei este mai specială, trebuie să adăugați o picătură de ulei de oglindă între diapozitiv și lentilă, ceea ce se datorează în principal următoarelor două aspecte:
1. măriți luminozitatea iluminării oglinzii de ulei de mărire de până la 100 Χ, mărirea unei lentile atât de mari, distanța focală este foarte mică, diametrul este foarte mic, dar intensitatea luminii necesară este cea mai mare. De la transportul specimenelor de diapozitiv prin lumină, datorită densității diferitelor medii (de la diapozitiv în aer și apoi în lentilă), o parte din lumină se va datora refracției sau reflexiei totale, nu poate intra în lentilă, rezultând în utilizarea oglinzii de ulei se va datora luminii mai puține, imaginea obiectului nu pare clară. Deci, pentru a nu face lumina prin pierdere, la folosirea oglinzii de ulei trebuie adăugată între oglinda de ulei și diapozitivul cu indicele de refracție al sticlei (n=1.55) similar cu oglinda de ulei. (de obicei cu ulei de cedru, indicele său de refracție n=1.52).
2. Mărește rezoluția microscopului Rezoluția sau puterea de rezoluție a unui microscop este capacitatea microscopului de a recunoaște distanța minimă dintre două puncte. Din punct de vedere fizic, rezoluția unui microscop optic este limitată de fenomenul de interferență și de performanța obiectivului utilizat. Puterea de rezoluție D poate fi exprimată astfel: D=λ/2N.A, unde λ=lungimea de undă a undei luminoase; NA=valoarea diafragmei numerice a obiectivului. Sursa de lumină a microscopului optic nu este posibilă dincolo de intervalul lungimii de undă a luminii vizibile (0.{4 - 0.7 μm), în timp ce valoarea numerică a diafragmei depinde de obiectivul unghiului gurii oglinzii și de refracția. indicele mediului dintre diapozitiv și lentilă, care poate fi exprimat astfel: NA=n × sin în care este jumătatea unghiului maxim de incidență al luminii. Depinde de diametrul și distanța focală a obiectivului, în general, în practică, maximul poate ajunge doar la 120 O, iar n pentru indicele de refracție al mediului. Deoarece indicele de refracție al uleiului de cedru (1,52) decât indicele de refracție al aerului și al apei (respectiv, 1.0 și 1,33) trebuie să fie mai mare, astfel încât uleiul de cedru ca lentilă în diapozitivul dintre mediul oglinda de ulei poate atinge valoarea numerică a diafragmei (NA este, în general, în 1.2-1.4) să fie mai mare decât lentila cu mărire redusă, lentilă cu mărire mare, cum ar fi oglinda uscată (NA sunt mai mici decât 1. 0). Dacă lungimea medie de undă a luminii vizibile este de 0,55 μm, o lentilă de mărire mare cu o deschidere numerică de 0,65 poate distinge doar obiectele aflate la o distanță de cel puțin 0. 4 μm, în timp ce rezoluția unei oglinzi de ulei poate fi de aproximativ 0,2 μm.
