Motivele pentru care bacteriile trebuie să fie fixate înainte de colorare în experimente de microscopie:
Uciderea celulelor este mai ușoară pentru coloranți.
Faceți bacterii să adere la diapozitive de sticlă și să nu fie spălate cu ușurință de apă.
Când se fixează, este necesar să se usuce lent. Dacă este necesar să accelerați procesul, îl puteți usca de câteva ori de la distanță deasupra flăcării lămpii de alcool. Nu uscați diapozitivul de sticlă până nu se încălzește, altfel poate deteriora forma de viață bacteriană
Colorarea gramului și observarea microscopică a bacteriilor
Principiul experimental
Principiul colorației Gram: reacții diferite ale bacteriilor la colorarea gramului sunt cauzate de diferențele de compoziție și structură a pereților lor celulari. Peretele celular al bacteriilor gram pozitive este compus în principal dintr -o rețea de peptidoglicani. Atunci când este tratat cu etanol, deshidratarea determină o scădere a dimensiunii porilor și a permeabilității structurii rețelei, ceea ce face dificilă spălarea și reținerea complexului de iod violet cristalin în interiorul celulei. După decolorare și contracarare, culoarea purpurie albastră a colorantului inițial este încă păstrată. Stratul peptidoglican de pe peretele celular al bacteriilor gram negativ este subțire și are un conținut ridicat de lipide. Prin urmare, atunci când este decolorizat, lipidul este dizolvat în etanol (sau acetonă), crescând permeabilitatea peretelui celular și facilitând spălarea complexului de iod violet cristal. După contrabandă cu o contracarare, celulele sunt colorate cu culoarea roșie a contracarainei. Principiul imagisticii microscopului: Microscopele optice obișnuite moderne folosesc două seturi de sisteme de lentile, un ocular și un obiectiv obiectiv, pentru a mări și a imagina, astfel încât acestea sunt adesea denumite microscopuri compuse. În sistemul optic al unui microscop, performanța obiectivului obiectiv este cea mai critică, iar mărirea obiectivului de ulei este cea mai mare, care este cea mai importantă pentru cercetarea microbiologică. Adăugarea de ulei de lentilă între diapozitivul de sticlă și obiectiv este în principal pentru a crește luminozitatea de iluminare și a spori rezoluția microscopului. Folosirea uleiului în loc de aer ca mediu pentru propagarea luminii reduce refracția sau reflectarea totală a luminii, făcând imaginea observată mai clară.
