Utilizarea corectă a microscopului cu fluorescență inversată
Microscopul cu fluorescență inversată este un microscop multifuncțional utilizat în domeniul cercetării în științe biologice de vârf. Structura sa este complexă și costisitoare. Prin urmare, pentru ca studenții absolvenți de medicină să înțeleagă corect funcționarea și utilizarea microscopului cu fluorescență inversată, profesorii trebuie mai întâi să demonstreze funcționarea efectivă a microscopului cu fluorescență inversată. Înainte s-a înființat un curs pentru a învăța cunoștințele de bază ale microscoapelor cu fluorescență inversată, introducând structura, principiul, funcția și metodele de bază de utilizare ale microscoapelor cu fluorescență inversată, iar apoi în operațiunea specifică, pentru diferite specimene, să demonstreze diferite funcții, de la superficiale. la adâncime, treptat Pentru a standardiza utilizarea microscoapelor cu fluorescență inversată de către studenții absolvenți de medicină.
1. Utilizarea corectă a observației în câmp luminos. Una dintre funcțiile microscopului cu fluorescență inversată este observarea în câmp luminos. Principiul de bază este că după ce specimenul este iradiat de lumină, absorbția luminii fiecărei părți este diferită pentru a realiza imaginile pe un fundal luminos. Este potrivit în principal pentru celule colorate sau colorate, Observarea specimenelor, cum ar fi secțiuni de țesut.
2. Utilizarea corectă a observării contrastului de fază. A doua funcție a microscopului cu fluorescență inversată este observarea contrastului de fază. Principiul său de bază este de a converti diferența de cale optică a diferitelor părți ale eșantionului în diferență de amplitudine. Observarea se realizează printr-o lentilă obiectiv cu contrast de fază cu o placă de fază și o lentilă condensatoare cu diafragmă inelară. Este aplicabil în principal pentru observarea celulelor vii sau a secțiunilor de țesut necolorate, în procesul de predare experimentală, pe lângă îndrumarea corectă a studenților absolvenți în medicină pentru a observa metodele de operare de bază ale observației contrastului de fază, este mai important să le ghidăm spre să înțeleagă și să stăpânească specimenele utilizate pentru observarea contrastului de fază. Pentru ei, observarea microscopică a celulelor cultivate este cea mai frecvent utilizată în cercetările științifice viitoare. În primul rând, pentru selectarea echipamentului celular, se recomandă, în general, utilizarea vaselor de cultură din sticlă și plastic, plăci de cultură și sticle de cultură. Cele mai multe dintre ele sunt incolore și transparente și pot fi observate direct la un microscop fluorescent inversat, fără a se scurge lichidul celular și alte tratamente. În al doilea rând, în timpul observației microscopice, nu deschideți capacul echipamentului după bunul plac, pentru a nu contamina celulele. În cele din urmă, pentru operatori, aceștia trebuie să poarte mănuși, măști și haine albe, care nu numai că își pot proteja propria sănătate, ci și pot preveni contaminarea celulară.
3. Utilizarea corectă a observației fluorescenței. A treia funcție a microscopului cu fluorescență inversată este observarea fluorescenței. Principiul de bază este utilizarea luminii de excitație pentru a excita proba pentru a genera fluorescență, astfel încât să se realizeze observarea formei și poziției probei. Este potrivit în principal pentru observarea probelor marcate fluorescent. Observarea cu fluorescență este o funcție importantă a unui microscop cu fluorescență inversată, iar accesoriile sale sunt scumpe și speciale de utilizat. Pentru ca studenții absolvenți de medicină să înțeleagă corect funcționarea și utilizarea observării fluorescenței, profesorii nu ar trebui să-i învețe doar metodele de funcționare de bază, ci, mai important, să-i învețe să-i stăpânească particularitățile. În primul rând, la pregătirea specimenelor, sticla de lame și sticla de acoperire trebuie să aibă o suprafață netedă și grosimea adecvată (sticlă de lame trebuie să fie între 0,8 mm și 1,2 mm, iar sticla de acoperire trebuie să fie de aproximativ 0}. {5}}.17mm); specimenul trebuie să aibă o grosime adecvată și să evite suprapunerea celulelor sau mascarea cu impurități; mediul de montare trebuie să utilizeze un amestec cu volum egal de glicerol și tampon carbonat (0.5mol/L pH9.0-9.5). În al doilea rând, înainte de observarea fluorescentă, lumina electrică din cameră și lumina albă a microscopului fluorescent inversat trebuie oprite pentru a asigura mediul într-o cameră întunecată. În cele din urmă, în observația cu fluorescență, timpul de observare ar trebui să fie strict controlat, în general 1-2 ore/timp este adecvat, altfel fluorescența se va atenua și va dispărea; la reglarea sursei de lumină, purtați ochelari de protecție pentru a evita deteriorarea ochelarilor de către razele ultraviolete.
4. Utilizarea corectă a capturii imaginii. În cercetarea științifică, nu este doar necesar ca microscopul cu fluorescență inversată să poată realiza diverse observații, ci și ca microscopul cu fluorescență inversată să poată realiza captarea imaginii. Sistemul de microscop cu fluorescență inversată combină un microscop optic cu un computer prin conversie fotoelectrică, nu numai pentru observarea microscopică pe ocular, ci și pentru observarea în timp real a imaginilor dinamice, editarea și salvarea pe computer.
