Cum să citiți rezultatele microscopiei fluorescente folosind tunel pentru a detecta apoptoza
1. Acordați atenție la trei puncte în observarea rezultatelor, metoda epi-proiecției, proiecția rezoluției și tratamentul cu filtru. Specific:
Metoda de iluminare este de obicei episcopică, adică sursa de lumină este proiectată pe probă prin lentila obiectivului;
Sursa de lumină este lumină ultravioletă, lungimea de undă este mai scurtă și rezoluția este mai mare decât cea a microscoapelor obișnuite;
Există două filtre speciale, cel din fața sursei de lumină este folosit pentru a filtra lumina vizibilă, iar cel dintre ocular și lentila obiectiv este folosit pentru a filtra razele ultraviolete pentru a proteja ochiul uman.
În al doilea rând, microscopul fluorescent utilizat pentru măsurarea apoptozei prin tunel este, de asemenea, un fel de microscop optic, principala diferență este că lungimile de undă de excitare ale celor două sunt diferite. Aceasta determină diferența dintre microscopul cu fluorescență și microscopul optic obișnuit în ceea ce privește structura și utilizarea. Microscopia cu fluorescență este un instrument esențial în citochimia imunofluorescentă. Este compus din componente principale, cum ar fi sursa de lumină, sistemul cu plăci de filtrare și sistemul optic. Este de a folosi o anumită lungime de undă a luminii pentru a excita specimenul să emită fluorescență și pentru a observa imaginea de fluorescență a specimenului prin amplificarea lentilei obiectivului și a sistemului de ocular.
3. Placă de filtrare cu suprimare a fluorescenței pentru măsurarea apoptozei în tunel Funcția plăcii de filtrare suprimată este de a bloca complet trecerea luminii de excitație și de a furniza fluorescență în intervalul de lungimi de undă corespunzătoare. Corespunzător plăcii de filtru de excitație, următoarele trei tipuri de plăci de filtru presate sunt utilizate în mod obișnuit:
Placă de filtru de presare a luminii ultraviolete: poate trece lumina vizibilă și poate bloca trecerea luminii ultraviolete. Poate fi combinat cu UG-1 sau UG-5. GG-3K430 sau GG-6K460 utilizate în mod obișnuit.
Placă de filtrare pentru suprimarea luminii albastre violet: poate trece lumina cu o lungime de undă peste 510 nm (de la verde la roșu) și poate fi combinată cu BG-12. De obicei, se utilizează OG-4K510 sau OG-1K530.
Placă de filtrare de presare a luminii ultraviolete: poate trece lumina cu o lungime de undă peste 460 nm (de la albastru la roșu), poate fi combinată cu BG-3, utilizat în mod obișnuit OG-11K470AK 490, K510.
