Cum să alegi între un microscop inversat și un microscop cu fluorescență?
În cultura celulară și experimentele derivate aferente, microscopul este un instrument foarte important. În prezent, pe piață există diferite tipuri de microscoape. Este o provocare să alegi un microscop care să răspundă nevoilor și să fie aplicabil. Mai jos este o introducere în principiile microscoapelor inversate și microscoapelor cu fluorescență, astfel încât să puteți alege cu ușurință.
Compoziția microscopului inversat este aceeași cu cea a microscopului obișnuit, incluzând în principal trei părți: partea mecanică, partea de iluminare și partea optică. Compoziția microscopului inversat este aceeași cu cea a microscopului vertical obișnuit, cu excepția faptului că lentila obiectiv și sistemul de iluminare sunt inversate, primul este sub scenă, iar cel din urmă este deasupra scenei. O astfel de structură poate extinde în mod semnificativ distanța efectivă dintre sistemul de concentrare a iluminării și scenă, ceea ce este convenabil pentru plasarea obiectelor mai groase de observat, cum ar fi vase de cultură și sticle de cultură celulară (desigur, sunt disponibile și lamele de sticlă etc.) , și în același timp, distanța dintre obiectivul și material Distanța de lucru dintre ele nu trebuie să fie foarte mare. Microscoapele inversate sunt utilizate pentru observarea microorganismelor, celulelor, bacteriilor, culturilor de țesuturi, suspensiilor, sedimentelor etc. în unitățile medicale și sanitare, instituțiile de învățământ superior și institutele de cercetare. Poate observa în mod continuu procesul de reproducere și diviziune a celulelor, bacteriilor etc. în mediul de cultură și poate face fotografii sub orice formă în acest proces. Este utilizat pe scară largă în citologie, parazitologie, oncologie, imunologie, inginerie genetică, microbiologie industrială, botanică și alte domenii.
Microscopia cu fluorescență este utilizată pentru a studia absorbția și transportul substanțelor în celule, distribuția și localizarea substanțelor chimice etc. Pentru obiectul supus inspecției, există două modalități de a genera fluorescența: autofluorescența, care emite fluorescență direct după ce a fost iradiat cu ultraviolete. ușoară; Unele substanțe din celule, cum ar fi clorofila, produc autofluorescență după ce sunt iradiate de razele ultraviolete; deși unele substanțe în sine nu pot fluoresce, ele pot emite și fluorescență secundară după ce au fost colorate cu coloranți fluorescenți sau cu anticorpi fluorescenți după ce au fost iradiate de raze ultraviolete. Microscopul cu fluorescență utilizează o sursă de lumină punctiformă cu eficiență luminoasă ridicată pentru a emite lumină cu o anumită lungime de undă (lumină ultravioletă 365 nm sau lumină albastră violet 420 nm) prin sistemul de filtrare ca lumină de excitație și după excitarea substanțelor fluorescente din specimen pentru a emite fluorescență a diferitelor culori, apoi Observarea se realizează prin mărirea obiectivului și a ocularului. În acest fel, sub un fundal de contrast puternic, chiar dacă fluorescența este foarte slabă, este ușor de identificat și are o sensibilitate ridicată. Este utilizat în principal pentru cercetarea structurii și funcției celulare și a compoziției chimice.
Microscoapele cu fluorescență sunt împărțite în tip de transmisie și tip de epiejecție, primul este mai primitiv, iar cel de-al doilea este mai avansat. Structura de bază a celor două tipuri de microscoape cu fluorescență este similară, principala diferență este: lumina de excitație de tip transmisie trece prin specimen, iar întregul specimen generează fluorescență, care apoi intră în lentila obiectivului. Cu cât mărirea este mai mare, cu atât fluorescența este mai slabă; lumina de excitație de tip epiemisie este proiectată pe suprafața specimenului, suprafața specimenului produce fluorescență, iar fluorescența intră din nou în lentila obiectivului. Cu cât mărirea este mai mare, cu atât fluorescența este mai puternică, care este potrivită pentru observarea cu mărire mare. Principalele componente ale microscopului cu fluorescență includ o sursă de lumină cu lampă cu mercur, o placă de filtru de excitație, o oglindă dicroică (tip episod), o placă de filtru presată și un condensator de câmp întunecat (tip de transmisie), etc. În plus, datorită generarea severă de căldură a lămpilor cu mercur, cele mai multe dintre ele sunt, de asemenea, echipate cu filtre de absorbție a căldurii. Unele microscoape cu fluorescență au, de asemenea, obiective de contrast de fază și diafragme inelare, astfel încât observațiile cu contrast de fază sunt posibile. Există și microscoape fluorescente care adoptă o structură inversată, un alt microscop inversat și așa mai departe.
În plus, microscoapele menționate mai sus pot fi asamblate într-un microscop digital prin instalarea unui CCD, care convertește imaginea fizică văzută de microscop într-o imagine pe un computer prin conversie digital-analogic. Prin urmare, putem schimba cercetarea pe câmpul microscopic de la observația binoculară obișnuită tradițională la reproducerea pe afișaj, îmbunătățind astfel eficiența muncii.
