Cum să alegeți un microscop cu fluorescență adecvat
Microscopul cu fluorescență este un echipament de imagistică microscopică standard în laboratoare și departamente de patologie, care folosește caracteristici de fluorescență pentru observare și imagistică. Este utilizat pe scară largă în diverse domenii, cum ar fi biologia celulară, neurobiologie, botanică, microbiologie, patologie, genetică, etc. Imagistica fluorescentă are avantajele sensibilității și specificității ridicate, ceea ce îl face foarte adecvat pentru observarea distribuției proteinelor specifice, organelelor, etc.
Selectarea sursei de lumină fluorescentă
Sursele fluorescente utilizate frecvent includ în prezent lămpi de mercur, lămpi cu halogenuri de metal și surse de lumină LED în curs de dezvoltare rapidă în ultimii ani. Spectrul surselor de lumină fluorescentă poate fi continuu sau discontinuu, iar energia variază în diferite benzi. Sursele de lumină LED devin treptat principala sursă de lumină pentru microscoape fluorescente, datorită benzilor spectrale relativ restrânse, a producției de energie mai stabile, a duratei de viață mai lungi și a unei mai mari siguranță și prietenie cu siguranță.
Microscop confocal
În observarea tradițională a microscopiei fluorescente, datorită suprapunerii substanțelor fluorescente de marcare și a structurilor de fluorescență spontană, acestea sunt strâns legate între ele. Cu toate acestea, obiectivele tradiționale de microscopie de epifluorescență nu numai că colectează lumina din planul focal, dar colectează și lumină împrăștiată deasupra și sub planul focal, ceea ce duce la o rezoluție și contrast de imagine redusă.
Imagistica confocală detectează doar porțiunea de lumină reflectată din planul focal, rezolvând astfel problema de mai sus. Sursa de lumină formează un loc mic și fin pe planul focal printr -o gaură, iar lumina emisă din planul focal este colectată de obiectivul obiectiv. Majoritatea fluorescenței emise din puncte deasupra sau sub planul focal al obiectivului obiectiv nu poate converge la gaură. Doar fluorescența situată pe planul focal și o porție mică de fluorescență defocalizată poate trece prin gălește, în timp ce fasciculul de lumină din afara planului focal converg în față sau în spatele plăcii de pin și este blocată să intre în detectorul prin pinul de pin. Imaginea detectată este imaginea din planul focal, astfel încât calitatea finală a imaginii este mult îmbunătățită.
Datorită diferitelor avantaje și practicitatea microscopiei confocale de scanare cu laser, microscopia confocală este în prezent un asistent experimental indispensabil în domeniile de înaltă precizie a biologiei celulare, a botanicii și a cercetării celulare. În același timp, în viitoarele centre de cercetare științifică, acesta va fi cel mai fundamental și de bază instrument de cercetare.
