Ați înțeles vreodată principiile de bază ale microscopiei cu contrast de fază?
Microscopul cu contrast de fază a fost inventat de omul de știință olandez Zernike în 1935 pentru observarea specimenelor necolorate. Pentru celulele vii și specimenele biologice necolorate, datorită diferenței dintre indicele de refracție și grosimea microstructurii fiecărei părți a celulei, atunci când unda luminoasă trece prin, lungimea de undă și amplitudinea nu se modifică, doar faza se schimbă (diferența de amplitudine). ), care este invizibil pentru ochiul uman. observa. Microscopul cu contrast de fază modifică diferența de fază și folosește difracția luminii și fenomenele de interferență pentru a schimba diferența de fază într-o diferență de amplitudine pentru a observa celulele vii și specimenele necolorate. Diferența dintre un microscop cu contrast de fază și un microscop obișnuit este că se folosește o diafragmă inelară în loc de o diafragmă variabilă, se folosește o lentilă obiectiv cu o placă de fază în loc de o lentilă obiectiv obișnuită și este furnizat un telescop pentru coaxialitate.
Principiile de bază ale microscopiei cu contrast de fază:
Folosind diferența de indice de refracție și grosime dintre diferitele componente structurale ale obiectului, diferența de cale optică care trece prin diferite părți ale obiectului este convertită în diferența de amplitudine (intensitatea luminii) și prin lentila condensatorului cu diafragmă inelară și diferența de fază cu o placă de fază Obiectivul realizează microscopul de observație. Este folosit în principal pentru a observa celule vii sau secțiuni de țesut necolorate și, uneori, poate fi folosit și pentru a observa probe colorate care nu au contrast.
Diferența de cale optică a luminii vizibile care trece prin specimen este schimbată într-o diferență de amplitudine, îmbunătățind astfel contrastul dintre diferitele structuri și făcând diferite structuri clar vizibile. Lumina este refractată după trecerea prin specimen, se abate de la calea optică inițială și este întârziată cu 1/4λ (lungime de undă). Dacă este mărită sau micșorată cu 1/4λ, diferența de cale optică devine 1/2λ, iar cele două fascicule interferează după axa luminii Întărește, mărește sau micșorează amplitudinea, îmbunătățește contrastul.
Microscopul cu contrast de fază are două funcții pe care alte microscoape nu le au: ① separă lumina directă (lumina de fundal în câmpul vizual) de lumina difractată de obiect; ② elimină aproximativ jumătate din lungimea de undă din fază, astfel încât să nu poată interacționa, rezultând o schimbare a intensității.
