Avantajele și dezavantajele microscopiei cu scanare cu laser
Avantajele sunt următoarele:
1. Excitată de lumina roșie sau infraroșie, împrăștierea luminii este mică (împrăștierea particulelor mici este invers proporțională cu puterea a patra a lungimii de undă).
2. Nu este nevoie de găuri, capabile să colecteze mai mulți fotoni împrăștiați din secțiunea transversală a imaginii.
3. Găurile nu pot distinge fotonii împrăștiați emiși din zonele defocalizate sau focale, iar multifotonii au un raport semnal-zgomot mai bun în imaginile profunde.
4. Lumina ultravioletă sau vizibilă utilizată pentru excitarea unui singur foton este ușor absorbită și atenuată de probă înainte ca fasciculul să atingă planul focal, ceea ce face dificilă excitarea straturilor profunde.
5. În ceea ce privește observarea la microscopie biologică, primul considerent este de a nu deteriora starea activă a organismului în sine și de a menține circulația apei, concentrația ionilor, oxigenul și nutrienții. În domeniul observării luminii, atât energia termică, cât și cea fotonică trebuie să rămână în doza de iradiere și energia luminoasă care nu dăunează celulelor.
6. Microscopia multifotonica are, de asemenea, multe avantaje. În ceea ce privește rezoluția tridimensională, invazia adâncimii, eficiența împrăștierii, lumina de fundal, raportul semnal-zgomot, controlul etc., microscoapele laser au caracteristici de neegalat sau superioare pe care microscoapele laser anterioare nu le posedau.
Microscopia de scanare laser confocală multifoton a fost extinsă la diverse domenii de cercetare și aplicație, poate efectua observații tridimensionale nedistructive pe probe în starea lor naturală și poate îmbunătăți rezoluția și raportul semnal-zgomot al sistemului. Prin utilizarea modificărilor proprietăților materialelor după excitarea multi fotoni, se poate realiza, de asemenea, stocarea datelor de înălțime tridimensională și microprocesare tridimensională în orice direcție, care are valoare de aplicare ridicată. Se poate crede că, odată cu dezvoltarea ulterioară a materialelor mecanice, , și tehnologiile laser legate de microscopia confocală multifoton, microscopia de scanare laser confocală multifoton va avea o dezvoltare mai mare și aplicații mai largi
Dezavantajele sunt următoarele:
1. Numai pentru imagistica cu fluorescență.
2. Dacă proba include cromofori care pot absorbi lumina de excitație, cum ar fi pigmenții, proba poate fi supusă deteriorării termice.
3. Rezoluția este ușor redusă, deși poate fi îmbunătățită prin utilizarea simultană a găurilor mici confocale, va exista pierdere de semnal.
4. Datorită limitărilor laserelor ultrarapide scumpe, costul microscoapelor cu scanare multifotoni este relativ mare.
